Rin1在膀胱尿路上皮癌中的表达和其临床意义.pdfVIP

·中文论著摘要· RINl在膀胱尿路上皮癌中的表达及其临床意义 目的 膀胱尿路上皮癌是泌尿外科的常见恶性肿瘤，其特点是易复发，当肿瘤侵及 肌层时无有效的诊断方法。膀胱恶性肿瘤中最常见的类型是尿路上皮癌，其余为 鳞癌和腺癌等少见类型。虽然膀胱癌的治疗水平逐年提高，但是其死亡率仍然增 加。肿瘤的分期和分级常作为预后的判断指标，但是这些指标特异性和敏感性较 差。 RINI基因位于染色体l 为Ras蛋白的效应因子被发现的，近年来发现其在介导信号转导方面发挥着重要 的作用。RINI一方面可以激活ABL酪氨酸激酶发挥其抑制细胞骨架蛋白重构的 抗侵袭功能：R1NI还与胰岛受体信号通路的传导和IL-3受体信号传导通路相关。 另一方面可以与RAB5蛋白结合介导EGFR、TpR等载体的内吞和再循环过程， 使得EGF、TGF．B等信号得以传导下去，发挥其相关功能。 研究发现RINI在结肠癌中有着高水平的表达。然而，在乳腺癌中RINI的表 达却是减少或缺失，研究中还发现Snail能够抑制RINI的表达，阻滞受体内吞再 循环来阻断信号的传导，促进乳腺癌的侵袭和转移，并认为在乳腺癌中RINI扮 演着一个抑癌基因的角色。因此，RINl在不同肿瘤中的表达是矛盾的。 这些研究均提示RINl在肿瘤发生、发展中的重要作用，但是在人类膀胱尿 路上皮癌中RINI的研究仍未见报道。本研究通过检测膀胱尿路上皮癌及正常膀 胱组织中RINl的表达情况，探讨膀胱尿路上皮癌中RINl蛋白表达与病理分期， 临床分期，肿瘤大小，肿瘤复发，肿瘤进展及鼬．67表达的相关性。寻找与膀胱 尿路上皮癌发生发展有关的分子标记物，为膀胱尿路上皮癌的诊断，恶性程度评 估及预后治疗研究提供新的思路。 方法 收集2010年7月一2010年11月中国医科大学附属第一医院泌尿外科手术切 除的20对新鲜膀胱尿路上皮癌及癌旁J下常组织。收集2004年5月一2008年11 月中国医科大学附属第一医院泌尿外科手术切除的96例原发性膀胱尿路上皮癌 标本和22例癌旁正常组织标本，年龄3871岁，平均55岁，其中69例为男性， 27例为女性。所有组织用10％福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片，厚度4岬。 生存期计算从手术同期到随访结尾R期，或由于复发、转移而死亡的日期为止。 癌旁组织距离肿瘤边缘大于5cm，所有上述患者术前均未接受放疗，化疗。 本实验通过实时定量PCR技术检测R1N1在膀胱尿路上皮癌及癌旁组织中的 表达；再通过免疫蛋白印迹技术检测方法与实时定量PCR的检测结果相互认证； 免疫组化法检测RINl蛋白在癌组织中表达的位置及其强弱；通过检测鼬．67的表 达，观察肿瘤细胞增殖与RINI的相关性；统计分析尿路上皮癌中RINl蛋白表达 与生存时问，复发，进展等特征的关系；Cox比例风险回归模型分析RINI与无进 展生存期，无复发生存期和总体生存期的预后因素关系。 结果 Real．timePCR结果发现，在20对新鲜的膀胱尿路上皮癌及癌旁组织中，有 16对的癌组织中RINI表达高于癌旁组织。在膀胱尿路上皮癌组织中，RINI的 blot结果认证了RINl在尿路上皮癌组织中的表达是升高的。 =0．004)。Western 免疫组化法发现，RINl蛋白主要在癌细胞的胞浆和胞核中表达，出现黄色或 棕黄色的细小颗粒着色为阳性细胞。在正常组织染色评分中RINI蛋白有很少的 2分)，将其视为J下常表达。而尿路上皮癌中的 细胞染色(根据我们的评分标准S RINl表达随着恶性程度的增高而逐渐升高。免疫组化法检测Ki．67时发现，鼬．67 年龄，性别，肿瘤大小，是否多发及淋巴结转移无相关性俨o．05)。RINI表达的 2 57．7％，68．7％，且具有统计学意义伊o．05)。 通过生存分析法来辨另0RrNl对生存时间的影响，在RINl高表达组中发现5年 生存率为29％，平均生存期为43．6-4．2个月。而在RINl低表达组中5年生存率为 学意义(尸=0．046)。因此，低表达的RINl组获得更长的生存时间。在生存期评估中 发现高表达的RINl蛋白与肿瘤复发无相关性(尸=O．261)，而与肿瘤的进展有差异性 (卢0．036)