RNAi对肺癌细胞Skp2基因表达的作用.pdfVIP

lIIII I IIIII I I IIII 1111l Y1 摘要 摘要 目的：通过构建针对skp2的siRNA质粒来转染人非小细胞肺腺癌细胞 方法：由公司构建针对skp2的siRNA质粒，采用脂质体法瞬时转染肺腺癌 p27mRNA表达情况，并使用MTT法检测实验组和对照组细胞的增殖能力变化 情况。此外，tunel法检测各组细胞的凋亡情况。 U6腻eo／GFP／RNAi质粒： 结果：公司成功构建了针对skp2的pGCsilencerTM 转染后对各组细胞生长增殖能力的影响，其中各实验组生长明显受抑制(P 0．05)，抑制率分别为25．4％，25．5％，25．1％。而阴性对照组抑制不明显，差异 ±O．6)96，(2．2±0．1)％。并且实验组可以观察多量的凋亡细胞。 基因表达无明显影响，由此推论对skp2基因表达的影响发生在转录，而对p27 基因的表达影响则是发生在转录之后。此外通过RNAi对skp2产生抑制作用后 可以使细胞的增殖能力明显受抑制，并诱导细胞凋亡。 关键词：肺癌，RNA干扰，skp2，p27，转染 Abstract ABSTRACT threesmall Objection：Designed interferingRNA(siRNA)-mediatedgene of vectorstoinhibit inhumannon··small silencingskp2 skp2up·-regulmion lung cancerA549．weexaminedthe of and and expressionskp2mRNAp27mRNA identifiedthe effectofA549invitro． growthinhibitory and to Methods：Thevetorswereconstructed weused bycompany liposome transienttransfection weexaminedthe of and A549，then expression skp2mRNA of andcontrol RT-PCRandmeasuredcell p27mRNAexperimentalgroup groupby examinedall index． MTT．Moreover,we growthby groups’apoptotic Results：The U6／Neo／GFP／RNAivectorsconcluded pGCsilencerrM andcontrolnectivevector were