RKIP对体外胆管癌细胞侵袭的作用.pdfVIP

中文摘要 RKIP对体外胆管癌细胞侵袭的影响 摘 要 是继肝癌之后的第2大肝胆系统肿瘤，胆管癌发生常见于中老年人，男性 略多于女性。胆管癌早期缺乏特异性的临床表现，肝外胆管癌在中晚期才 会出现典型黄疸症状，肝内和肝外胆管癌的早期就诊率很低，所以治疗效 果也不尽人意，严重影响了人类的健康与寿命。与大多数肿瘤一样，胆管 癌的发生是一个多步骤进程，建立在机体本身遗传因素与环境因素相互作 用的基础之上。在胆管癌的发生发展过程中，由于胆管上皮细胞的慢性损 伤，通过自身增殖信号激活、抗生长信号丢失，逃脱凋亡，无限复制、血 管异常增生等多个步骤，最终导致胆管癌的发生与浸润、转移。 kinaseinhibitor Raf激酶抑制蛋白(Raf 结合蛋白家族(phosphatidylethanolalmine．binding 之一，广泛存在于不同种属。它参与多种信号转导通路的调节，被认为能 联受体激酶．2(GPCR-2)来发挥受体信号调节器的作用。最近多项研究发 现，RKIP与肿瘤关系密切，参与肿瘤的发生及发展。RKIP在大多数肿 瘤中低表达，调控肿瘤细胞的生长、凋亡、浸润及转移等多种生物学行为， 但RKIP对各种肿瘤细胞生物学行为的影响及其机制需进一步研究。我们 将就RKIP对胆管癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及机制进行研究。 的构建，探讨RKIP过表达及低表达对胆管癌细胞株RBE的增殖、凋亡、 侵袭及迁移能力的影响，探讨RKIP对RBE细胞生物学行为影响的机制， 是否通过Raf／MEK／ERK信号转导通路介导产生。 方法：细胞增殖行MTT及BrdU掺入法分析；通过流式细胞术、透 射电镜技术及TUNEL技术检测细胞凋亡；通过体外细胞侵袭实验检测 RBE细胞的侵袭能力；通过伤口愈合实验检测细胞的迁移能力。通过 Western 及GAPDH蛋白的表达。 中文摘要 转染RBE细胞48 48 h后，各组凋 无差异。(4)TUNEL检测结果显示，在腺病毒感染RBE 亡细胞极少且各组之间无差异。(5)透射电镜结果显示，RKIP．AD组与 52．67+16．6218 比，侵袭力明显增加(1 7．00+6．48w GFP．AD组相比，侵袭力明显下降(1 (8)Western w 比，RKIP．AD组大量表达RKIP异位蛋6(2．77+0．95O．85士0．44)，与 7 无差异。(9)Westernblot检测Raf及ERK的磷酸化水平显示各组均未见 blot检测GRK2蛋白的表达情况，结果显示，与 差异。(10)Western 1S GFP．AD组相比，RKIP．AD组GRK2的表达降低(O．41：L0．44 1．35-{-0．62)， 18 (1．434-0．530．67士0．42)，与control组相比，GFP．AD组及 NC．RNAi．GFP．AD组均无差异。 结论：RKIP对胆管癌细胞的增殖及凋亡无影响；RKIP抑制了胆管 无影响，但参与了G蛋白偶联受体通路的调节。 1 英文摘要 TheeffectofRldP ● ．● ^ l l ● ●