RNA干扰CtBP1基因表达逆转人子宫内膜癌耐药细胞株B-MD-C1(ADR++)多药耐药的探究.pdfVIP

中文摘要…………… 英文摘要…………… 研究论文RNA干 B．MD—C1(ADR+件)多药耐药的研究 引言………………………………………………………………………．5 及CtBPl基因shRNA真核表达载体的构建 前言………………………………………………………………………．7刖吾………………………………………………………………………．’7 材料与方法………………………………………………………………．8 结果……………………………………………………………………．．20 附图……………………………………………………………………．．22 附表……………………………………………………………………．．27 讨论……………………………………………………………………．．28 小结……………………………………………………………．．：……．．30 参考文献………………………………………………………………．．3l l 第二部分 沉默CtBPl基因逆转人子宫内膜癌耐药细胞株B．MD．C (ADR卅)多药耐药 前言……………………………………………………………………．．35日!J舌……………………………………………………………………．．35 材料与方法……………………………………………………………．．35 皇日刁≮………………………………………………………………………jy结果………………………………………………………………………39 附图………………………………………………………………………40 附表………………………………………………………………………42 讨论……………………………………………………………………．．43 小结……………………………………………………………………．．45 参考文献………………………………………………………………．45 综述子宫内膜癌耐药因子研究进展……………………………………．．47 致谢…………………………………………………………………………．．57 个人简历……………………………………………………………………．．58 中文摘要 RNA干扰CtBPl基因表达逆转人子宫内膜癌耐药细胞株 B．MD．C1(ADR卅)多药耐药的研究 摘 要 中MDRl基因表达及P．gp蛋白产生的影响，以及人子宫内膜癌耐药细胞 对ADM敏感性的变化，以探讨CtBPl基因在逆转肿瘤多药耐药中的意义。 方法：1采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测人子宫内膜癌耐药细胞 株B．MD．C1(ADR+／+)的耐药倍数。 2采用逆转录．聚合酶链反应(revers transcription 细胞内MDRl基因的表达。 3采用免疫印迹技术(western blot)检测人子宫内膜癌耐药细胞株 达。 的RNA干扰真核表达重组质粒载体，采用脂质体法将重组质粒瞬时转染 人子宫内膜癌耐药细胞株B．MD．C1(ADR+／+)。 5采用逆转录．聚合酶链反应(revers transcription 默。 6采用免疫印迹技术(westemblot)检测人子宫内膜癌耐药细胞株 检测RNA干扰是否封闭P．gP蛋白表达。 7 72小时后人子宫内膜癌耐药细胞对ADM敏感性的变化，用于检测RNA 干扰能否逆转人子宫内膜癌耐药细胞的多药耐药性。 中文摘要 结果：1 抑制浓度IC50分别为2 1 非常显著差异(pO．01)。 2 (叭)细胞则未检测到该基因表达，两者具有非常显著差异(pO．01)