RNA干扰技术阻断PTEN表达对体外活化肝星状细胞细胞周期的作用.pdfVIP

111111 1 Ill It Itll l l l l ILl Y1800582 ···············-··················l ……………………………·5 英文缩写………………………………………………………………………··10 研究论文 RNA干扰技术阻断PTEN表达对体外活化肝星状细胞细胞 周期的影响 1一 前言…………………………………………………………………………………………··1刚舌…………………………………………………………………………………………”l 材料与方法………………………………………………………………·13 结果…………………………………………………………………………………………··2l 附图…………………………………………………………………………25 附表…………………………………………………………………………………………38 讨论…………………………………………………………………………………………··39 结论…………………………………………………………………………………………·-42 参考文献…………………………………………………………………43 综述PTEN蛋白磷酸酶活性研究新进展………………………………45 致谢…………………………………………………………………………………………………··55 个人简历………………………………………………………………………56 对体外活化肝星状细胞细胞周期的影响 摘 要 肝纤维化(hepatic 而发展为肝硬化的共有病理改变和必经途径，是肝脏对各种慢性损伤产生 的一种修复反应。其主要病理改变是细胞外间质(extracellularmatrix，ECM) stellate 的过度合成与异常沉积。肝星状细胞(hepaticcells，HSC)是肝脏主 要的纤维生成细胞，其活化后可在肝损伤部位移行、增殖，表达各种信号 转导蛋白，产生大量以胶原为主的ECM成分和细胞因子，是肝纤维化形 成的中心环节。随着对肝纤维化发病机制的深入研究，如何抑制HSC活 化、增殖，进而减少ECM合成，已成为目前阻断甚至逆转肝纤维化的重 要策略。 and tensin deletedonchromosome homology Ten，PTEN)是迄今发现的第一个 具有磷酸酶活性的肿瘤抑制基因，可负性调控肿瘤细胞细胞周期、抑制肿 瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡，其缺失或表达异常与多种肿瘤的发生发 展密切相关。 近年来，对PTEN的研究已从肿瘤领域逐渐延伸到非肿瘤领域。研究 发现，特异性肝细胞PTEN缺失不仅引起肝细胞癌，还导致与肝纤维化密 切相关的非酒精性肝炎的发生。而我们的前期研究表明，在胆总管结扎肝 纤维化大鼠肝组织中PTEN蛋白及mRNA表达均低于正常大鼠肝组织并 与在体HSC的活化、增殖呈显著负相关；进一步研究发现，过表达的PTEN 可显著抑制体外活化HSC的增殖、诱导其凋亡，并且PTEN过表达可通 达对体外活化HSC细胞周期的影响仍不清楚。 RNA干扰(rUqA 特异性抑制靶基因的转录，进而下调相应蛋白水平及功能。为此，我们在 前期研究的基础上，构建了靶向PTEN的RNA干扰重组腺病毒