Tiaml在食管鳞癌中的表达和Tiaml siRNA联合索拉非尼在食管鳞癌中的初步功能研究.pdf

摘要 Tiaml在食管鳞癌中的表达及TiamlsiRNA联合索拉非尼 在食管鳞癌中的初步功能研究 博士研究生：刘怀民 导 师：孙燕教授 郑州大学第一附属医院肿瘤科郑州河南450052 摘 要 食管鳞癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，在世界恶性肿瘤发病率中居第六 位，是当今世界上对人类健康危害最大的恶性肿瘤之～，中国是食管鳞癌的高 发区，高发区遍及我国大江南北十余个省市，尤其在河南省林州市。随着医疗 水平的提高，食管鳞癌的治疗现状较过去已有明显改善，然而，大多数食管鳞 癌病人在诊断时为晚期转移癌，并且预后极差，总体带着转移的食管鳞癌病人5 年的生存率不到10％。迄今为止，尚没有理想的预后和长期存活的指标来检测 食管鳞癌病人，因此从分子水平上探讨食管鳞癌发生发展的分子机制有助于改 善病人的预后和提高患者的生存质量。 T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(T-cell invasionandmetastasis1， lymphoma 许多种不同类型细胞的形态转化、细胞运动以及细胞的迁移过程。目前，越来 越多的研究表明Tiaml在肿瘤发生发展中发挥极其重要的作用。此外，MAPK MAPK的支架蛋白IB2／J 信号途径之一的p38 IP2能够与Tiaml的N2末端区域 结合，促使IB2／JIP2与ML K3、MKK3和p38的结合的增强，同时也增强了 MAPK等信号通路，引 Tiaml对Rac的转换作用，活化的Rac激活JNK、p38 起一系列的生理病理变化，包括细胞凋亡、细胞增殖及细胞分化等过程，提示 是一种口服的多激酶抑制剂，在临床前的研究中发现其可以作用于肿瘤细胞和 肿瘤的脉管系统来抑制肿瘤的增殖，索拉非尼对肿瘤细胞的这种抑制的分子机 摘要 制主要是在Raf激酶水平上通过靶向MAPK信号转导途径来抑制肿瘤细胞的增 殖和诱导肿瘤细胞发生凋亡。 上述的研究显示，Tiaml与索拉非尼的共同的交汇点可能是通过MAPK信号 转导途径来调控肿瘤细胞相应的细胞生物学行为的变化，包括细胞增殖以及细 胞凋亡等，从而提示Tiaml与索拉非尼之间可能存在着某种内在的联系。然而， 迄今为止，Tiaml与食管鳞癌发生发展的关系以及TiamlsiRNA联合索拉非尼在 食管鳞癌中的作用在国内外尚未见报道，因此，在本研究中共分为三部分来探 讨Tiaml siRNA联合索拉非尼对食管鳞癌细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影 响，并研究其相关的分子作用机制，该研究旨在为以Tiaml为靶点、索拉非尼为 辅助药的食管鳞癌的基因治疗提供理论依据。 第一部分：Tiaml在食管鳞癌中的表达及其与预后的关系 方法 1．采用原位杂交技术检测1 73例食管鳞癌组织、95例癌旁不典型增生组织 及173例正常食管黏膜组织中TiamlmRNA的表达，并分析其与临床病理学参 数之间的关系。 2．采用免疫组织化学方法检测173例食管鳞癌组织、95例癌旁不典型增生 组织及173例正常食管黏膜组织中Tiaml蛋白的表达，并分析其与临床病理学 参数之间的关系。 3．利用半定量RT-PCR技术检测随机选取的3例食管鳞癌组织和相对应的3 例正常食管黏膜组织中TiamlmRNA的表达。 4．采用Western blotting技术检测随机选取的3例食管鳞癌组织和相对应的 3例J下常食管黏膜组织中Tiaml蛋白的表达。 5．利用Kaplan-Meier生存曲线分析TiamlmRNA和蛋白的表达与食管鳞癌 病人预后之间的关系。 6．统计学处理：半定量RT-PCR和Western blotting