TP53、BIRC7、ANXA1及ENO1血清自身抗体在肺癌诊断与预后判断上的应用.pdfVIP

f㈣嬲 TP53、BIRC7、ANXA 1和ENO1血清自身 抗体在肺癌诊断与预后判断上的应用 硕士研究生：李磊 指导教师：吴一龙 摘要 研究背景 肺癌在世界范围内均是死亡率和发病率最高的恶性肿瘤。肺癌的发病率与 香烟的流行关系密切，发达国家肺癌发病率明显高于发展中国家。由于发达国家 对于香烟的限制措施，肺癌的发病率已进入平台期，死亡率正在下降。临床实 者为40％50％。肿瘤出现局部、区域、远处转移的患者五年生存率分别为49％、 16％、2％。据统计2／3的初诊患者已经为晚期，失去了手术治愈的机会，这导致 肺癌整体人群总生存率不超过16％。近期研究发现通过对早期肺癌的筛查，可 以提高肺癌的总生存率。因此，在不断寻求治疗手段提高生存的基础上，进行 肺癌早期筛查才能提高疾病整体的预后。目前肺癌的筛查手段缺乏足够的敏感 性和特异性，寻找简单、经济、准确的诊断技术一直都是研究的热点。 肿瘤相关抗原是肿瘤发生、进展过程中细胞坏死释放、脱落或者外分泌的 特异蛋白产物，其与人体免疫系统相互作用可产生特异性自身抗体。自身抗体 不仅具有免疫监视、免疫预防和免疫反应的作用，同时由于其在循环系统中稳 定的丰度，所以也可能作为早期诊断的标志物。但是经过大量的研究发现，单 个标志物的敏感性和特异性不足以满足肺癌筛查，多个标志物组合是获取高敏 感性和高特异性诊断的手段。目前常用的自身抗体检测技术包括酶联免疫吸附 实验、噬菌体展示技术、血清蛋白组学分析及蛋白芯片等常见方法，多种方法 中文摘要 的应用丰富了自身抗体表达的水平的检测手段。尽管如此，大多数自身抗体诊 断模型的研究还没有得到有效的验证，限制了其在临床应用的进一步发展。 回顾性的分析显示，大多数肿瘤相关抗原参与了细胞周期调控、增殖分化、 凋亡抑制、血管生成、肿瘤转移及能量代谢等肿瘤细胞赖以生存的信号通路， 其表达水平以及其血清自身抗体的水平与疾病预后可能存在相关性，因此血清 自身抗体不仅具有诊断价值同时也具有预后价值。 之前的研究我们已经使用真核表达系统成功表达了10个肿瘤相关抗原，应 用这些TAAs与肿瘤自身抗体的检测，我们构建了4个自身抗体的组合，该组合 诊断肺癌的敏感性93％，特异性92％。本研究拟筛选出独立样本对学习集的诊 断模型进行验证，同时也进一步研究其与临床预后的关系，为个体化治疗寻求 新的靶标打下理论基础。 研究目的 本研究目的为利用4个肿瘤相关抗原检测初治肺癌患者及对照组血清，分 析肺癌患者相关临床因素对自身抗体表达的影响，评估相应的血清自身抗体单 独或联合应用对肺癌的诊断价值。评价学习集自身抗体组合的诊断价值。进一 步探索血清标志物的预后价值。 研究方法 。 化蛋白做为包被溶液，建立间接法ELISA并检测116例初治肺癌患者、38例对 照组(健康自愿者及良性疾病患者)血清，获取受试者血清自身抗体的光密度 值(OD值)。以“对照组平均OD值+2×标准差”及“对照组平均OD值+3×标 特异性，描绘ROC曲线及算出AUC。根据广东省人民医院电子病历系统收集肺 癌患者临床相关信息(年龄、性别、体力评分状态、吸烟等级、肿瘤大小、TNM 分期、治疗方案及总生存时间)，分析临床参数与自身抗体之间的关系。 统计方法：使用独立样本t检验比较两组样本的平均数，三组以上的平均数 lI 硕士学位论文 的比较采用单因素方差分析(One—WayANOVA)，均数比较如果不满足方差齐性， 则采用非参数检验。率的比较采用卡方检验。描绘每个自身抗体的ROC曲线， 以曲线下面积评价其诊断肺癌的价值，曲线下面积之间比较采用Z值检验。利 test分析单因素与 用logistic回归构建诊断肺癌模型。Kaplan-meier法及109．rank 非小细胞肺癌患者预后的关系。多因素COX回归分析肺癌患者临床因素及自