TRPC6介导DU145细胞条件培养液诱导人脐静脉内皮细胞增殖的探究.pdfVIP

／㈣螋煳 目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………”l 英文论著摘要……………………………………………………………………·4 二、英文缩略语………………………………………………………………………‘7 三、论文 盲行言…………………………………………………………………………………………………………·8 刖罱…………………………………………………………………………………………………………‘5 材料与方法………………………………………………………………………”8 实验结果…………………………………………………………………………·13 讨论………………………………………………………………………………………………………”15 ‘ 结{念………………………………………………………………………………………………………“16 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………l7 五、参考文献…………………………………………………………………………18 六、附录 9 综j丕………………………………………………………………………………………………………．．1 在学期间科研成绩………………………………………………………………30 致谢……………………………………………………………………………………………………·31 个人简介…………………………………………………………………………32 ·中文论著摘要· 皮细胞增殖的研究 刖 舌 前列腺癌占男性恶性肿瘤相关致死原因的第二位。近年来，在中国前列腺癌 的发病率和病死率有逐年上升的趋势。新生血管的形成在前列腺癌的发生和转移 中起到重要的作用，血管内皮生长因子在这个过程中是一个关键的介导。在体内， 当肿瘤细胞释放血管生成物质，如成纤维生长因子(FGF)和血管内皮生长因子 (VEGF)，可传递预形成血管壁的信号，从而开始血管形成的过程。 肿瘤条件培养上清液中可能含有大量的促细胞分裂因子，几乎所有由肿瘤细 胞分泌的生长因子都可以诱导内皮细胞增殖，最终经过分化形成新的血管壁。 钙离子是普遍的细胞内信使，控制多种细胞活动过程，如基因的转录，肌肉 的收缩和细胞的增殖。TRF通道可能与肿瘤细胞增殖有关。这是因为TRP都是钙 通道，允许钙离子进入细胞内。而在细胞内，钙离子作为第二信使，控制着细胞 内一系列重大生物活动，尤其是细胞的增殖。最近有研究表明，TRPC6通道参与 多种细胞的增殖过程，本实验观察DUl45细胞条件培养液作用于hUVEC后，细 过程中的作用。 实验方法 l、DUl45细胞的培养及肿瘤条件培养液的制备 1640 在37C，5％C02，正常氧浓度，饱和湿度条件下，10％的胎牛血清，PRMI 培养基培养DUl45细胞至对数生长期，弃去培养液，重新加入不含血清的PRMI 1640培养液继续培养48h后，收集培养液上清，即肿瘤细胞条件培养液(TCM， tumorconditioned medium)，．20℃冰箱冻存，备用。 2、h小厄C细胞的培养 养基培养hUVEC细胞。 3、实验分组 对照组：用无血清DMEM培养液培养hUVEC；实验组：将制备好的肿瘤细 胞条件培养液与无血清DMEM培养液分别按照l：2、1：1、2：1比例混合后培 养hUVEC，作用48h。加干预因素前经血清饥饿法达同步化。 4、hUVEC细胞增殖率的检测