HA及血凝抑制试验HI.PPT

病毒的血凝试验（HA）及血凝抑制试验(HI) 一、目的要求 掌握HA和HI试验的基本操作技术，了解其实用价值。 二、实验材料 1、新城疫病毒 2、1%鸡红细胞 3、生理盐水 4、禽流感阳性血清 5、96孔“V”型微量反应板 三、实验内容 1、HA试验术式表： 2、HI试验术式表： 四、作业 1、病毒凝集红细胞是不是一种特异的抗原抗体反应？为什么？ 2、HI试验是不是特异的抗原抗体反应？为什么 病毒的红细胞凝集试验（HA） 一、 概念 病毒的红细胞凝集现象：许多病毒表面有血凝素，能与各种动物的红细胞表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称为病毒的血凝现象。 二、应用 1、当以被检动物的某一器官为病料，进行HA试验，结果为阳性者，证明该被检材料中有能凝集红细胞的某种病毒。 2、凝集价的测定：将被检病毒材料，稀释成不同的稀释倍数，进行HA试验，出现血凝现象的各稀释孔中，以100%能出现病毒的红细胞凝集现象的病毒的最大稀释倍数者即定为凝集价(血凝价) （二）按下表顺序加样 　　　　　　　　　　　　　　 弃去25 37℃ 15-30min 以100%凝集病毒最大稀释孔为该病毒的凝集价 血凝抑制试验(HI) 一、概念： 1、HI试验：病毒的红细胞凝集现象，可以被特异性免疫血清所抑制，称HI试验。 2、抗体效价：出现红细胞凝集抑制现象的血清的最大稀释倍数叫抗体效价。 HI试验 * 1：2048 1：1024 …….. 1：8 1：4 1：2 病毒稀释倍数 ﹟﹟ ﹟ ﹟卅 _ …….. …….. …….. 4 5 6 7 8 9 _ 25 25 25 10 _ _ ﹟ ﹟ ﹟ 结果判定 25 25 25 25 25 红细胞 25 25 25 25 病 毒 25 25 25 25 25 生 理盐水 12对照 11 3 2 1 96孔板孔号 二、动物体内抗体存在情况 1、当动物感染某病毒而发病时，可在机体的相应器官查出病毒。 2、病毒相当于免疫效应物质中的抗原，病毒进入动物机体，将发生特异性免疫反应，即产生免疫物质——抗体（ 90%抗体都存在于动物的血清中），抗原和抗体发生特异性结合反应 3、病畜体内，因受病毒抗原刺激，产生大量相应抗体，故体内抗体效价较高 4、健康动物，免疫接种后，因受疫苗（抗原）刺激，而发生免疫应答反应，体内抗体效价较高 _ ﹟ ﹟ _ 十 十十 # # # _ _ _ 结果判定 25 25 …….. 25 25 25 25 红细胞悬液 以100%抑制凝集的血清最大稀释度为该血清的滴度，即血清效价 振荡1分钟，37℃温箱15—20分钟 振荡1分钟，37℃温箱15分钟 弃 25 25 25 …….. 25 25 25 4单位病毒 25 25 …….. 25 25 25 血清 25 25 25 …….. 25 25 25 生理盐水 1：2048 1：1024 …….. 1：8 1：4 1：2 血清稀释倍数 血清 对照 病毒对照 10 4 5 6 7 8 9 3 2 1 孔号 *