凋亡素基因对裸鼠种植性人胰腺癌的治疗探究.pdf

凋亡素基因对裸鼠种植性人胰腺癌的治疗研究 研究生：颜斌 专业：外科学普通外科 导师：王庆宝教授 中文摘要 背景 2000年以后，全球经济飞速发展，人类生活水平不断提高，生活习惯与饮食结 构发生相应改变，人类疾病谱也发生了一定的改变，癌症成为了威胁人类健康的主要 杀手。近几年来，在人类所患肿瘤中，胰腺癌所占的比例越来越大，成为威胁人类健 240 康的头号杀手。有数据统计表明，2009年，美国新增胰腺癌患者42470例，死亡35 例，病死率约等于发病率，患者总的5年生存率不足5％t11。虽然近几年医疗技术和医疗 设备都得到了很大发展，胰腺癌的诊断率和胰腺癌的手术切除率都比以前有很大提高， 手术的死亡率及术后的并发症也比以前有显著下降，但治疗效果并没有显著的改善， 术后患者5年存活率仍较低。 近年来，分子生物学技术发展迅速，人们对肿瘤发病机制及凋亡机制的认识也有 了质的飞跃，人们发现通过诱导细胞凋亡来治疗肿瘤是可以实现的。因此，寻找和开 发能促使细胞凋亡的促凋亡因子是肿瘤治疗方案中的一个重要步骤。通过研究人们发 现国外报道的一种能诱导细胞凋亡的小分子蛋白一凋亡素(Apoptin)具有很好的应 anemia 用价值。它是鸡贫血病毒(chicken virus，CAV)的功能蛋白，最先由国外报道， 能诱导肿瘤或转化细胞凋亡，对正常细胞或非转化细胞无杀伤功能。与其他凋亡诱导 因子不同，它诱导凋亡不需肿瘤抑制基因p53，不受抗凋亡基因bcl一2抑制，相反过 表达的Bcl一2对其还有促进作用。凋亡素有望成为一种全新的肿瘤抑制剂。 目的 通过建立人类胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型，观察研究含凋亡素基因的质粒对人胰 腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用，为胰腺癌的基因治疗提供理论依据。 研究方法 在裸鼠皮下注射人胰腺癌PANC—l细胞，建立裸鼠皮下移植瘤模型，当肿瘤长至 于肿瘤局部，将pEGFP—C2组，生理盐水组设定为对照组，观察裸鼠背部肿瘤及裸鼠 1 生长情况；5周后处死裸鼠，取肿瘤组织石蜡包埋，常规切片，HE染色，TUNEL凋 亡试剂盒检测移植瘤凋亡情况。 结果 成功建立裸鼠皮下移植瘤模型，pEGFP．Apoptin治疗组裸鼠皮下移植瘤大小较 pEGFP．C2组和生理盐水组有显著差异，组织学结果提示凋亡素通过诱导胰腺癌细胞 凋亡来抑制肿瘤生长。 结论 凋亡素能明显抑制胰腺癌细胞生长，可通过诱导胰腺癌细胞凋亡来抑制人胰腺癌 裸鼠皮下移植瘤的生长。 关键词凋亡素；鸡贫血病毒；细胞凋亡；胰腺癌；移植瘤 2 PANCREATICCANCER XENoGRAFTHU剐喳N THERAPYFOR BYAPoPTINGENE INⅣⅡCE剐匝DICATED Yan Bin Postgraduate： Surgery Speciality： 1、ltor： Professor QingbaoWang ABSTRACT Background After the of