冲击波及地塞米松诱导自体血清培养的hMSCs成骨分化的实验研究.pdf

目 录 OOOO…………………………………………………l 中文摘要……………OI 英文摘要……………………………………………………………………4 英文缩写……………………………………………………………………8 研究论文冲击波与地塞米松诱导自体血清培养的hMSCs成骨分化的实验 研究 前言……···…···………···O刖舌“”一““”“一“”“”“。 OOOOO…······…………······……··-……···9“”“”“”“一“”“”“”“一””””””。9 材料与方法……………………………………………………………10 结果···············-······················-·····················-···…···-···-···18 附图··················-············································-··············20 附表……………………………………………………………………34 讨论····…················································-······················35 结论··············································································42 参考文献………………………………………………………………43 综述．．”“”““．．”“““”””””．．”””””一“””””””“一“”一””一“”一”47 个人简历……………………………………………………………………55 中文摘要 冲击波与地塞米松诱导自体血清培养的hMSCs成骨分化的实验 研究 摘 要 目的：人骨髓间充质干细胞(human stem mesenchymal 是从骨髓中分离得到的一种多潜能干细胞，具有自我更新和多向分化潜 能，已证实这类细胞在合适的体内外特定条件下可向成骨、软骨、神经、 肌肉、皮肤和肝等多种类型的成熟细胞分化，因而是组织工程领域中的理 想的种子细胞。但由于骨髓中hMSCs的数量有限，在进行体内移植前必须 进行体外扩增。目前主要应用胎牛血清(fetalbovine hMSCs的体外培养，而胎牛血清本身可能传染病毒、带来异种免疫原，且 存在排斥反应的问题，这极大地阻碍了hMSCs在临床上的应用，而自体血 清(autologous 应用传统的地塞米松，但地塞米松浓度的差异对hMSCs的影响很大，浓度 稍微增大，对细胞增殖有明显抑制作用，并有向脂肪细胞诱导分化的趋势。 shockwaves 体外冲击波疗法(extracorporeal 著促进成骨细胞增殖，近年来利用其治疗股骨头缺血性坏死、骨不连及骨 折延迟愈合等取得了良好的疗效。我们利用ESWT与地塞米松比较对AS 培养的hMSCs进行成骨分化。本研究国内外均未见报道。本研究利用 探索一种新的治疗方法，从而指导临床治疗。 方法： 血100ml，然后分离出AS(约55m1)。 别用10％AS和1 countingkit-S)澳J细胞增殖曲线、检测细胞表面标记物、细胞周期及免疫细 胞化学染色检测比较两组hMSCs的增殖状况。 中文摘要 统的诱导成骨培养基(10nM地塞米松、50uM抗坏血酸、10mMB．甘油磷 ALP染色、茜素红染色及RT．PCR测成骨基因(碱性磷酸酶、骨钙素、 骨桥蛋白、骨结合素、I型胶原)表达比较两组成骨分化情况。对所有数 据x4-s表示统计学分析，设定P0．05为有统计学意义。 结果： 上形态无明显差异，具有典型的hMSCs形态，随着代次的增加，部分细胞 逐渐变扁，贴壁性减