半叶马尾藻多糖口服液抗辐射作用探究.pdf

半叶马尾藻多糖口服液对辐射损伤小鼠的抗辐射作用 中文摘要 【目的】 我国海藻资源十分丰富，但海藻加工技术落后，应用研究项目太少，只能以 饲料、琼胶和卡拉胶等低附加值的形式卖出，经济效益不明显。由于利润非常低， 采集野生海藻的人少，使大部分野生海藻处于自生自灭的状态，海藻资源优势无 法转化为经济优势。研究表明，半叶马尾藻多糖不仅有提高机体免疫功能、增强 造血能力，而且具有清除自由基和减少脂质过氧化的抗辐射功能。如果开发成抗 辐射口服液，既可以用于接受放疗的患者，拮抗电离辐射对正常组织的损伤，减 少放疗患者的副作用；又可以用于接受阳光中紫外线较多的人群。本课题通过碘 hemiphyllum 射作用，为开发海藻资源提供实验资料。 【方法】 1．半叶马尾藻多糖的提取、纯化、分离和鉴定 (1)用水煮醇沉法提取半叶马尾藻多糖 (2)Sevage法去蛋白纯化 (3)凝胶过滤柱层析分离得半叶马尾藻纯多糖的不同组份 (4)通过理化实验、ICP、紫外光谱扫描和溴化钾压片红外光谱测定等方法 分析多糖的理化性质、微量元素、纯度和分子结构。 2． 半叶马尾藻多糖口服液的制备 取适量半叶马尾藻多糖溶于水中，加入柠檬酸、白糖、蜂蜜，加热搅拌均匀， min。 趁热过滤，再加入适量山梨酸钾，过滤，封口，高压灭菌20 3．碘【131I】化钠溶液对小鼠免疫及造血功能的影响 (1)碘[n1I】化钠溶液腹腔注射辐射损伤小鼠模型的建立 (2)黄嘌呤氧化酶法测定SOD、过氧化氢酶试剂盒测定CAT、硫代巴比妥 酸法测定MDA (3)流式细胞术检测小鼠胸腺和脾细胞周期 (4)MTT法检测小鼠胸腺和脾细胞自发增殖及ConA诱导的脾胸腺细胞增殖 反应 (5)骨髓象和骨髓细胞周期的检测 4．半叶马尾藻多糖口服液对辐射损伤小鼠的抗辐射作用 (1)称重法检测小鼠胸腺和脾指数 (2)黄嘌呤氧化酶法测定SOD、过氧化氢酶试剂盒测定CAT、硫代巴比妥酸 法测定MDA (3)ELISA法检测小鼠血清IL一2 (4)流式细胞术检测小鼠胸腺和脾细胞周期 (5)血常规分析仪计数小鼠全血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板 (6)组织切片观察SHP对辐射损伤小鼠脾组织的影响 (7)MTT法检测小鼠胸腺和脾细胞自发增殖及C0nA诱导的脾胸腺细胞增殖 反应 (8)骨髓象及骨髓细胞周期的检测 【结果】 1．半叶马尾藻多糖的提取、纯化、分离和鉴定 应用热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法去蛋白、凝胶过滤柱层析分离的方法 从半叶马尾藻中成功提取出棕色粉末状多糖，提取率为6．56％，总糖含量为 78．5％，提取纯化的半叶马尾藻多糖(SHP)是均一组分，纯度高。等离子体发射 光谱分析表明SHP含多种有益人体的矿物元素，紫外光谱分析表明该多糖不含蛋 白质，红外光谱分析表明SHP是一种酸性多糖，含有硫酸基、乙酰基、甘露糖基 和葡萄糖基。 2．半叶马尾藻多糖口服液的制备 产品呈棕色，略有红糖昧，味感协调柔和，酸甜适口，澄清透明，无沉淀， 2 无肉眼可见的外来杂质。 3．碘【131I】化钠溶液对小鼠免疫及造血功能的影响 (1)碘【131I】化钠溶液腹腔注射后，小鼠胸腺细胞和脾细胞自发增殖和ConA诱导 增殖能力下降，随着辐射剂量的增高，损伤作用越强。 (2)辐射损伤小鼠胸腺细胞和脾细胞均发生了Gl期阻滞，而S期和G2／M期细胞 百分数相对于正常对照组有显著减少，且呈剂量依赖关系。 (3)辐射损伤造成小鼠骨髓细胞发生Gl期阻滞，细胞进入S期受阻，且呈剂量 依赖关系；骨髓细胞损伤严重，尤其是粒系体积增大，核变性、溶解。 (4)辐射损伤小鼠的血液中超氧化歧化酶SOD及过氧化氢酶(CAT)的活性与正常 对照组比较明显下降，丙二醛MDA的含量显著增高，且呈剂量依赖关系。 (5)确定辐射损伤适宜剂量为37Mbq。 4．半叶马尾藻多糖口服液对辐射损伤小鼠的抗辐射作用 d预防性给予SHP口服液，辐射损伤小鼠胸腺和脾脏指数增高