多西他赛节律化疗和EGCG抑制胃癌生长和抗血管生成的实验研究.pdfVIP

‘·中文论著摘要· 多西他赛节律化疗及EGCG抑制胃癌生长及抗血管生 成的实验研究 目 的 tolerable 在细胞毒性水平上最大耐受剂量(maximum dose,MTD)进行化疗是 治疗进展期胃癌的主要方法，然而其毒副反应和耐药性严重影响了治疗效果。为 与常规化疗相区别，2000年HanahanD首次提出节律性化疗的概念，也就是持续低 low-dose 剂量化疗(continuous 法，增加了对肿瘤微血管的靶向治疗效果，毒副反应小，且不易产生耐药。多西 他赛为紫杉类抗肿瘤药物，有实验报道其具有显著的抗血管生成作用，以多西他 赛为基础的化疗方案是近20年来胃癌治疗的重要进展之一。 节律化疗与其它抗血管生成药物合用时抗肿瘤效果明显提高，但目前所发现 的血管抑制剂多为基因重组表达的蛋白制剂，面临着用药剂量大、提取困难、微 生物的浸入、价格昂贵及患者需长期坚持服用等方面的困扰，在临床应用中受到 一定的制约。最新研究显示绿茶及其最主要的活性成分表没食子几茶素没食子酸 节律多西他赛和血管形成抑制剂EGCG对胃癌生长及肿瘤血管生成的抑制作用， 并探讨二者联合应用对胃癌的治疗价值。 材料与方法 umbilical 1、采用低剂量的多西他赛，持续作用于人脐静脉内皮细胞株(human veinendothelial h，MTT法观察细胞 cells，HUVEC)和人BGC．823胃癌细胞株144 法(ELISA)检测各条件培养液中TSP．1的蛋白分泌。 中，实验组加入不同浓度的EGCG，使其终浓度分别为5，10，20，40，80lunol／L， h、96h和144h后，MTT法检测各孔吸 对照组则加等量不含药物的培养液。48 光度值(OD值)，计算细胞生长抑制率。 增殖抑制效应的协同性观察 中过夜培养，次日分别加入多西他赛(终浓度分别为0．001，0．01，O．1，1 nmol／L)， EGCG20 20 ttmol／L，EGCGttmol／L与多西他赛(终浓度为0．001，0．01，O．1，1nmol／L) 混合液，144 h后MTT法检测各孔吸光度值(OD值)，计算细胞生长抑制率。计算 Q值，并判断两药的联合效应。 4、建立荷人BGC．823胃癌细胞裸鼠移植瘤模型，将荷瘤小鼠随机分成5组， 大耐受剂量多西他赛、低剂量多西他赛、EGCG及低剂量多西他赛联合EGCG腹 腔注射，观察肿瘤生长情况，小鼠体重和外周血白细胞数。免疫组化染色，测定 CD3 1和血管内皮生长因子(vaseul盯endoⅡleliflgrowthfactor，VEGF)表达情况。 5、统计学方法 结果数据以i士s表示，采用SPSSl7．0软件进行统计学处理，采用单因素方差分 析和Pearson相关分析。检验水准伍=0．05。 实验结果 l、多西他赛对人HUVEC的抑制作用强于对BGC．823胃癌细胞的抑制作用， nmol／L和1．1士0．024 计算的IC50值分别为0．06士0．005 nmol／L。较低IC50浓度的多 西他赛作用于HUVEC引起细胞凋亡的百分比近似于较高IC50浓度的多西他赛作 增加。 2、EGCG对人胃癌BGC．823细胞的增殖有显著抑制作用，呈时间、剂量依 2 赖性，随着浓度的增加，时间的延长其抑制作用增强(尸o．05)。同一时间，BGC．823 细胞增殖抑制率与EGCG浓度呈正相关；同一浓度，BGC