大黄素对重症急性胰腺炎肠动力障碍的保护作用机制探究.pdfVIP

目 录 1 大黄素对重症急性胰腺炎肠动力障碍的保护作用机制研究 …………………………………………………………………1 1.1 中文摘要………………………………………………………1 1.2 英文摘要………………………………………………………3 1.3 前言……………………………………………………………7 1.4 材料与方法……………………………………………………9 1.5 结果……………………………………………………………20 1.6 讨论……………………………………………………………29 1.7 结论……………………………………………………………39 1.8 参考文献………………………………………………………40 1.9 英汉缩略词对照表……………………………………………44 2 致谢……………………………………………………………46 3 重症急性胰腺炎胃肠动力影响的研究进展（综述） …………………………………………………………………47 4 在读期间发表的论文…………………………………………57 2 大黄素对重症急性胰腺炎肠动力障碍的保护作用机制研究 摘 要 目的：本实验通过建立重症急性胰腺炎大鼠模型，检测胰腺及小 肠平滑肌细胞形态学指标、小肠推动力率及小肠平滑肌细胞凋亡，探 讨大黄素对大鼠重症急性胰腺炎肠动力障碍的保护作用及其机制。方 法：将45 只雄性SD 大鼠随机分为重症急性胰腺炎模型组(SAP组)、 大黄素治疗组（大黄素组）和假手术组(SO组)，每组15 只。SAP 组 和大黄素组均采用胰腺被膜下均匀注射3.8％牛磺胆酸钠溶液制备大 鼠重症急性胰腺炎模型，SO 组开腹后仅翻动胰腺。大黄素组在造模 后距幽门10cm 处小肠穿刺注射大黄素溶液(0．5ml ／100g，浓度 5mg ／ml)，SAP 组和SO 组在造模后距幽门 10cm 处小肠穿刺注射生理盐 水(0．5ml ／100g)。各组动物于造模48 小时后亚甲蓝-甲基纤维素灌 胃30 分钟后检测小肠推动率；处死大鼠取胰腺组织包埋、切片，染 色作病理组织学检查；小肠组织戊二醛固定后电子显微镜观察超微结 构变化；取小肠组织包埋、切片后TUNEL 法检测细胞凋亡、免疫组织 化学法检测细胞色素C；取小肠组织，机械分离粘膜层、粘膜下层及 浆膜层取平滑肌组织制备单细胞悬液检测线粒体膜电位。所得计量资 料均以均数±标准差（ ±S）表示，采用SPSS13.0 统计学软件进行 x 单因素方差分析，组间多重比较采用LSD 法，检验水准α=0.05，以 P0．05 为差异有统计学意义。结果：１、大鼠小肠推动率结果显示 SAP 组小肠推动率较大黄素组及SO 组明显下降（P0.05），大黄素组 3 小肠推动率明显高于SAP 组，差异显著（P0.05）。２、SO 组大鼠开 腹后无红色腹水、胰腺无坏死、出血；SAP 组大鼠开腹后肉眼可见大 量血腹水，肠腔积气明显，胰腺组织明显坏死、出血，大网膜可见出 血及坏死灶；大黄素组大鼠开腹后可见少许淡红色腹水，肠腔积气较 SAP 组明显减轻，胰腺组织坏死、出血较SAP 组减轻。胰腺组织病理 评分提示SAP 组与SO 组、大黄素组病理评分有显著差异（P0.001）， 大黄素组在病理评分上明显低于SAP 组（P0.001）。3、小肠平滑肌 细胞超微结构提示SAP 组小肠平滑肌细胞线粒体明显减少、水肿、破 裂；大黄素组小肠平滑肌细胞线粒体减少不明显、轻度水肿；SO 组 小肠平滑肌细胞超微结构基本正常.4、小肠平滑肌细胞凋亡及细胞色 素C 结果均显示SAP 组阳性表达程度较SO 组显著升高（P0.001）， 而大黄素组阳性表达程度较SAP 组明显降低（P0.05）。5、小肠平滑 肌细胞线粒体膜电位结果显示SAP 组线粒体膜电位（绿色荧光强度： 5.07±0.92）明显低于SO 组（绿色荧光强度：2.40±0.5），大黄素 组线粒体膜电位（绿色荧光强度：3.28±0.28）较SAP 组（绿色荧光 强度：5.07±0.92）明显升高。结论： 1、通过胰腺被膜下注射3.8% 牛磺胆酸钠可以