大蒜素诱导卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3DDP凋亡机制探究.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 等凋亡相关基因表达变化，探索大蒜素诱导肿瘤细胞凋亡的机制。 方法： 将SKoV-3／DDP细胞随机分为对照组、大蒜素组、顺铂组和大蒜素+顺铂组； 大蒜素组仅加入浓度为40ug／ml的大蒜素，顺铂组加入浓度为40ug／ml的顺铂， 法测定各组细胞增殖抑制率，利用金氏公式计算两药的合用指数(q)分析两药 示两药作用协同：q0．85表示两药作用拮抗【¨。RT-PCR方法观察各组基因P53、 Bax、Bcl．2 mRNA的表达，Westernblot法观察各组P53、Bax、Bcl．2蛋白表达 变化。 结果： 1、大蒜素组、顺铂组、大蒜素+顺铂组对SKOV-3／DDP细胞生长均有抑制 作用，与空白对照组相比有统计学意义(PO．05)，大蒜素组抑制率高于顺铂组 但与大蒜素组对SKOV-3／DDP细胞的抑制率间无统计学意义。其中大蒜素组、 大蒜素+顺铂组对SKOV-3／DDP细胞的抑制率呈时间依赖性。大蒜素+顺铂组作 分别为0．85；根据金氏公式可以推测，两药合用24小时后的作用效果表现为协 同作用；两药合用48小时后的作用效果表现为相加作用。 2、顺铂组促凋亡基因P53mRNA及蛋白的表达与空白对照组相比无统计学 mRNA及蛋白的表达 意义fPO．05)，大蒜素组、大蒜素+顺铂组促凋亡基因P53 mRNA及蛋 高于顺铂组、空白对照组(PO．05)，大蒜素+顺铂组促凋亡基因P53 白的表达与大蒜素组间无统计学意义(P0．05)。 摘要 mRNA及蛋白表达 3、大蒜素组、顺铂组、大蒜素+顺铂组促凋亡基因Bax mRNA及蛋白表达高于顺铂组 较空白对照组明显增加(P0．05)，大蒜素组Bax mRNA mRNA及蛋白表达高于其各自单用时Bax fP0．05)，大蒜素+顺铂组对Bax 及蛋白表达口0．05)。 4、顺铂组抑凋亡基因Bcl．2mRNA及蛋白的表达与空白对照组相比无统计 学意义(P0．05)，大蒜素组、大蒜素+顺铂组Bcl．2mRNA及蛋白表达量较顺铂组、 mRNA及蛋白表达低于大蒜 空白对照组明显降低(P0．05)，大蒜素+顺铂组Bax 素组(PO．05)。 结论： l、大蒜素对SKOV-3／DDP细胞生长有抑制作用，呈时间．效应关系。大蒜 素对SKOV-3／DDP的抑制作用强于顺铂。大蒜素和顺铂间有协同／相加作用。 mRNA及蛋 2、大蒜素作用于SKOV-3／DDP细胞后，促凋亡基因P53、Bax 白的表达增高，而抑凋亡基因Bcl．2mRNA及蛋白的表达降低，且优于顺铂。大 mRNA及蛋白的表 蒜素与顺铂联合作用SKOV-3／DDP后促凋亡基因P53、Bax mRNA及蛋白的表达降低较各自单用组明显。 达增高，和抑凋亡基因Bcl．2 3、大蒜素组促凋亡基因P53mRNA和蛋白表达量增多，伴随着促凋亡基因 BaxmRNA和蛋白有显著性增高。表明大蒜素诱导细胞凋亡机制可能是先诱导 P53mRNA和蛋白表达，通过P53基因进一步诱导BaxmRNA和蛋白表达，发 挥连锁凋亡激活效应。 4、大蒜素组Bax蛋白显著性增高，同时伴Bcl．2蛋白表达量减低，表明大 蒜素诱导细胞凋亡机制可能是通过升高Bax蛋白，下调Bcl．2蛋白，从而促进 SKOV-3／DDP细胞凋亡。