房水微环境对树突细胞成熟状态的作用.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………………l 英文摘要……………………………………………………………………………3 研究论文房水微环境对树突细胞成熟状态的影响 前言………………………………………………………………………………………………66日lJ吾……………………………………………………………………………………………………………………………… 材料与方法……………………………………………………………………7 结果……………………………………………………………………………………………．1O 附图…………………………………………………………………………．13 讨论………………………………。………吖…………………………………………………．18 结论……………………………………………………………………………………………．20 1 参考文献……………………………………………………………………2 综述 树突细胞在眼免疫调节中的研究进展……………………………．26 致谢…………………………………………………………．．．…………………………………………42 个人简历…………………………………………………………………………．43 中文摘要 房水微环境对树突细胞成熟状态的影响 摘 要 目的：眼处于免疫赦免状态和很多因素有关，其中包括解剖因素，如 血眼屏障、缺少直接淋巴引流通路等，此外，房水中还存在大量起免疫抑 cells。 制作用的因子对免疫细胞活性有广泛的调节作用。树突细胞(dendritic DCs)是体内功能最强的抗原递呈细胞(antigen．presentingcell，APC)，广泛 存在于虹膜、睫状体和房水流出通道却没有得到应有的关注。本实验通过 LPS)介导的DCs成熟的抑制作用。 方法：取新鲜处死的猪的眼睛，保证球壁完整以防房水被污染和渗漏， 针头刺入前房，使房水自动流入连接的硅化微量离心管，保存于．800C； 培养骨髓源DCs，培养基培养7天，半量换液后，1 收集悬浮和半贴壁细胞即为成熟的DCs。经流式细胞术鉴定DCs表面特 异性分子标记物CDllc以观察细胞纯度。为了研究房水对DCs成熟状态 LPS共培养48h)， 的影响，将未成熟DCs分为三组：对照组(与lpg／ml 实验l组(与11．tg／ml 胞，通过流式细胞术做表型和内吞功能的鉴定。尼龙毛柱法分离得到雄性 半量换液加入房水，继续培养48h，观察DCs的成熟状态。实验数据应用 1 SPSS3．0软件包进行统计学分析。 结果：1DCs培养7天后，可见较多细胞呈半悬浮生长，大量细胞集 落形成，集落部分细胞表面出现长短不一毛刺样突起，并可见少量单个悬 中文摘要 浮的典型DCs，经流式细胞术鉴定DCs表面特异性分子标记物CDllc细 胞纯度达到70％。 2房水抑制DCs表型成熟：对照组呈现出表型成熟状态，表现为高表达 不同处理组并没有影响DCs数量。 力发现，房水呈剂量依赖性抑制LPS介导内吞功能；尼龙毛柱法分离得 混合淋巴细胞反应中对照组DCs经LPS刺激后表现为强的刺激T细胞增 殖能力，实验2组较实验1组刺激T细胞能力则减低，并在l：10比例组 可观察到实验2组的刺激能力是对照组1／3。 lc的 表达，也即各组DCs具有均一性。房水能够显著抑制LPS诱导的DCs 抑制作用。尽管封闭EP2受体对房水的抑制作用没有影响，但是内吞功 结论：1房水呈剂量依赖性抑制LPS介导的DCs表型和功能的成熟， 的刺激T细胞增殖的能