槲皮素对转化生长因子-βlt;,1gt;诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖和肌动蛋白-α表达的影响.pdfVIP

1 槲皮素对转化生长因子一131诱导的大鼠心肌成纤维细 胞增殖及肌动蛋白．仅表达的影响 摘 要 诱导的新生SD大鼠心肌成纤维细胞(CBFs)增殖及肌动蛋白．0【 (仅．SMA)表达的影响，探讨槲皮素抑制心肌纤维化的作用机制。方 法：1．心肌成纤维细胞分离、培养与鉴定：用胰酶消化组织分离细胞， 差速贴壁法纯化获得心室肌成纤维细胞为材料，用光学显微镜和免疫 细胞化学的方法鉴定细胞。2．检测方法：采用WST-1检测心肌成纤维 细胞增殖情况，采用流式细胞仪分析对心肌成纤维细胞周期的影响， 免疫细胞化学染色(SABC法1观察心肌成纤维细胞的a．SMA的表达 情况。3．实验分组：将心肌成纤维细胞传代培养后，根据不同的药物 及药物的不同浓度，将实验分为三个部分。第一部分：观察Quc对 基础状态下的心肌成纤维细胞是否有影响。共分四个组：空白对照组 的影响。共分为五个组：空白对照组，TGF．pl诱导增殖对照组，不 维细胞的细胞周期影响共分为四个组：TGF．pl诱导增殖对照组，不 的终浓度为5烬几。 (4)数据处理：用SPSSl3．0软件包；细胞活度 OD值数据用均数±标准差(；±s)表示，单因数方差分析进行统计 学处理，卡方检验，两两比较采用标准四格表法，检验水准为P0。05 有统计学意义。结果：1．培养的细胞经过光学显微镜和免疫细胞化学 染色的方法鉴定为心肌成纤维细胞，纯度95％以上。2．Que在基础状 态下对心肌成纤维细胞的增殖无明显抑制作用。Que各浓度组 导的心肌成纤维细胞由G。／G1期进入S期，QUE各浓度组S期的 浓度的增加而减少，各浓度组之间比较差异均有统计学意义 (Po．01)。结论：1．QUE对基础状态下心肌成纤维细胞增殖无明 显地抑制作用，但呈浓度依赖性对TGF．Dl诱导的心肌成纤维细胞增 殖的有一定地抑制作用，表明QUE对应激状态下的心肌成纤维细胞 增殖有一定地抑制效应；2．QUE呈浓度依赖性阻止TGF．pl诱导的 一tl,肌成纤维细胞由G。／Gl期进入S期，并能明显抑制TGF．pl的诱 mh．． ’r ㈣Y㈣川—● ‘， 。5 帆1● ●■V 导心肌纤维化的途径之一。 关键词：转换生长因子pl；槲皮素；心肌成纤维细胞；细胞增殖； 肌动蛋白．a，细胞周期 Effectof onthe and of quercetin proliferationexpression actin—ainduced in by rat transforminggrowthfactor-pl cardiacfibroblast theroleof Abstract：Objective：To investigate the andthe of proliferation expressionactin一0【(0【一SMA)of