格尔德霉素和其顺铂联合应用对人卵巢癌细胞SKOV3和SKOV3DDP耐药性影响的研究.pdfVIP

中文摘要 格尔德霉素及其与顺铂联合应用对人卵巢癌细胞SKOV3及 SKOV3／DDP耐药性影响的研究 摘 要 目的：卵巢癌是妇科恶性肿瘤之一，我国卵巢癌发病率居妇科肿瘤第 三位。目前对于卵巢癌的认识和诊断治疗方法取得了较大进展，但是总生 存率仍然徘徊不前。肿瘤减灭术术后辅助化疗是治疗卵巢癌的主要方法， 但由于化疗药物的多药耐药性(MDR)，致使后续化疗失败。因此研究 肿瘤耐药机制，逆转耐药成为近年来研究的热点与难点。研究发现，在体 内作为分子伴侣的热休克蛋90(HSP90)对肿瘤的发生发展起着重要作用， 格尔德霉素(GA)是一种特异性的HSP90抑制剂，在体内可阻断肿瘤赖 以生存的信号通路网络，有一定逆转多药耐药性的作用。本研究旨在探讨 格尔德霉素及其与顺铂联合应用对人卵巢癌细胞SKOV3及顺铂耐药细胞 株SKOV3／DDP耐药性的影响及其机制，为卵巢癌耐药机制提供基础实验 依据。 ． 方法： 1MTT法检测不同浓度顺铂(3，6，9 I_tg／mL)、格尔德霉素(20、40、 200、400、2000 及顺铂耐药卵巢癌细胞株SKOV3／DDP的增殖抑制作用，并计算格尔德霉 2RT-PCR法检测顺铂、格尔德霉素及格尔德霉素联合顺铂处理 况。 3 表达情况。 结果： 1格尔德霉素(20、40、200、400、2000 细胞具有显著的增殖抑制作用，而且格尔德霉素对两种细胞的增殖抑制作 中文摘要 的增殖抑制作用逐渐增强，且呈剂量依赖性。不同浓度顺铂(3，6，9 明显增殖抑制作用，呈一定的剂量依赖关系，顺铂对SKOV3细胞的抑制 作用较SKOV3／DDP明显；格尔德霉素联合顺铂的逆转倍数分别为2．24、 的增殖抑制作用，抑制作用均高于格尔德霉素和顺铂的单独应用，且可逆 转顺铂的耐药性。 2RT-PCR检测基因水平上，LRP、GST-7r DDP细胞中的变化，结果显示：格尔德霉素、顺铂及格尔德霉素联合顺 48 铂作用于SKOV3h后，各组的LRP、GST-兀表达均下降，与对照组比 mRNA 有显著差异(氏0．05)，且格尔德霉素联合顺铂组下调LRP、GST-7r 两种耐药基因的作用明显高于单药格尔德霉素和顺铂组；SKOV3／DDP 细胞经上述药物处理48h后，格尔德霉素组及格尔德霉素联合顺铂组的 LRP、 霉素联合顺铂组LRP、GST-Tr mRNA的下调作用强于单药格尔德霉素组， 而在顺铂组，两种耐药基因的表达无明显降低，与对照组相比无明显差异 (胗0．05)。 3 铂及格尔德霉素联合顺铂作用48h后，各组的LRP、GST-尢表达均降低， 与对照组比有显著差异(氏O．05)，且格尔德霉素联合顺铂组下调LRP、 GST-r【两种耐药基因的作用明显高于单药格尔德霉素和顺铂组； SKOV3／DDP细胞经上述药物处理48h后，格尔德霉素及格尔德霉素联合 格尔德霉素联合顺铂组的下调作用高于格尔德霉素组。而顺铂组两种耐药 基因的表达无明显降低，与对照组相比，比值无明显差异(胗0．05)。 结论： 均明显强于格尔德霉素和顺铂单独使用，且可显著逆转DDP的耐药性。 2 mRNA和蛋 2 中文摘要 和蛋白的表达更强。 3格尔德霉素联合顺铂可下调耐药基因LRP、GST-7tmRNA和蛋白 LRP、GST-n mRNA和蛋白表达的下调均强于单药组。 胞中的耐药基因LRP、GST-x而改善卵巢癌细胞对顺铂的耐药性。 关键词：卵巢癌；格尔德霉素；顺铂；耐药基因；热休克蛋90