人参皂苷C-K在大鼠体内的组织分布及排泄的分析研究.pdfVIP

摘 要 人参皂苷C-K 为20(S)-O-β-D-吡喃葡萄糖基原人参二醇，现代药理学研究表明，人参皂苷 C-K 具有抗突变、抑制癌细胞转移、细胞毒、诱导细胞调亡、逆转药物耐药和抗肿瘤诱导的血 管新生等多种药理活性，是一种很有前途的化合物，值得进行新药研究开发。 本文建立了液相色谱-串联质谱联用（LC-MS/MS ）法，测定大鼠组织、尿、粪、胆汁生物 样本中的人参皂苷C-K 浓度。以其结构类似物甘草次酸为内标，生物样品经液-液萃取后，以甲 醇/ 乙睛(3:2,V/V)为流动相A，乙酸铵溶液(10mmol/L)为流动相B，梯度洗脱，程序：0—2.5 min, A95%—B5% ；2.6—3.5min , A50%—B50%;3.6—6min,A95%—B5 % ；采用BDSC18 色谱柱 （50mm×2.1mm I.D.，5µm）进行分离，流速为0.25mL·min-1 。通过液相色谱-串联质谱法以多反 应监测（MRM ）方式检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 621.4→m/z161.1 （C-K），m/z 469.3 3 -1 -1 →m/z 425.2( 内标)；人参皂苷C-K 的线性范围为2.0-2.0×10 ng·mL ，定量下限为2.0 ng·mL 。 方法的日内、日间精密度(RSD)小于15%，准确度(RE％)在15%范围内。满足体内药物分析要求。 -1 人参皂苷C-K 在大鼠体内分布广，大鼠静脉给药(1.5 mg·kg )后，C-K 在肝、肾、胰腺、肠、 肾上腺和心脏中药物浓度较高，脑、脂肪、膀胱、最少。各主要组织中药物消除较快，表明该 药物经静脉给药后不易在体内产生蓄积。C-K 在心脏、肾、肺和脾中含量明显偏高，这提示C-K -1 乳剂具有一定的靶向作用。C-K 原形药物的排泄较少，大鼠静脉给药(1.5 mg·kg ) 48h 后，在尿 中的排泄量很少，累积排泄量只占给药剂量的0.0032%，在粪中的累积排泄量占给药剂量5.37%， -1 大鼠静脉给药(1.5 mg·kg )24 h 后，在胆汁中的累积排泄量占给药剂量16.89%，推测人参皂苷C-K 部分可能以其代谢产物如苷元原人参二醇等形式排泄。 丹参素是丹参水溶性提取物的主要有效成分。本文以氯霉素为内标，采用本文采用液相色 谱-串联质谱联用（LC-MS/MS）法研究丹参素单体给药后丹参素在beagle 犬体内的药代动力学 -1 2 和绝对生物利用度。丹参素在2-400ng·mL 范围内呈良好的线性响应，加权（w ＝1/C ）最小二 乘法计算得 r 为0.9985，最低定量限为2ng·mL–1 。丹参素浓度分别为5，50 和400ng·mL-1 的三 II 个质控（QC）样品的准确度（RE%）分别为-5.7%、-1.4%和3.4%；日内、日间精密度（RSD） 分别为5.6%、5.5%、6.4%和 2.9%、6.2%、9.0%，满足药代动力学研究要求。丹参素在Beagle 犬体内为二室开放模型，口服绝对生物利用度为40%，适合制成口服制剂。Beagle 犬静脉注射 和灌服丹参素2mg·kg-1 后，半衰期T1/2 分别为2.23 ±0.20h 和3.3±074h，灌服丹参素后的达峰时 -1 -1 间Tmax 为1.0±0.32h，犬静脉注射丹参素后的清除率CL 为1.24±0.60ml·min ·kg 。 关键词：人参皂苷C-K；丹参素；组织分布；排泄；药物动力学；绝对生物利用度；液相色谱- 串联质谱