肠杆菌中产超广谱β-内酰胺酶菌株的基因型探析.pdfVIP

摘要 目 的：肠杆菌科细菌成员庞大、最为常见，与人类疾病关系十分密切。 肠杆菌科细菌对广谱p．内酰胺类抗生素耐药的常见机制是产生超广谱p． 内酰胺酶(extended．spectrum 因，本实验将运用核苷酸序列分析技术了解武汉市第三医院临床分离的肠 杆菌科细菌的ESBLs基因型及产ESBLs菌感染现状，为临床合理用药以及 延缓耐药控制措施方案的制定提供一定的理论参考。 方 l lq-12月临床分离的双纸片协 法：收集武汉市三医院201q-1月至201 同初筛试验为阳性的产ESBLs肠杆菌科细菌，采用临床实验室标准化协会 推荐的标准纸片扩散法表型确证试验(药敏纸片头孢他啶、头孢他啶／克 计PCR扩增的通用引物，提取待测菌的DNA作为扩增模板，对确证实验 产物并进行基因测序，将测序结果与NCBI数据库进行基因比对从而对 ESBLs耐药基因进行分型。 结 果：本实验收集武汉市三医院分离的333株ESBLs初筛试验阳性的肠 杆菌科细菌主要来源于创面分泌物，占所有标本的36．6％，其次为痰和尿 液标本。运用纸片扩散法表型确证试验确证ESBLs阳性菌283株，其中大 肠埃希菌占67．1％，肺炎克雷伯菌占23．3％，奇异变形杆菌占3．5％，普通 变形杆菌占2．2％，阴沟肠杆菌占3．9％。对纸片扩散法表型确证试验确证 CTX-M-14群耐药基因。未发现SHV型耐药基因。 结论：实验结果表明纸片扩散法表型确证试验与常规PCR扩增试验阳 性率一致性高于77．39％；通过武汉市三医院2011年度ESBLs阳性菌全 院科室分布统计得出ESBLs阳性菌检出率最高的科室是烧伤科，占全院 是肺炎克雷伯菌；通过对纸片扩散法表型确证试验确证ESBLs阳性菌株 进行常规PCR扩增，扩增产物进行基因测序，将测序结果在NCBI数据 库进行基因比对，同源性均在99％以上。并得出该院最为流行的耐药基 染的预防和治疗提供可靠参考。 关键词：超广谱p一内酰胺酶 耐药基因 聚合酶链反应基因分型 ABSTRACT oBJECTIVE：Clinical．solatesof Enterobacteriaceaearethemostcommon membersin and havebeenassociatedwithhumandisease． hospitalsthey consideredtobeoneofthe Extended．-spectrumbeta．．1actamases(ESBLs)are most antibioticresistance important mechanism．Nucleotideisthe sequencing standardandcarldetectall golden variants．Inthe main study,thegenotypes and the characteristicsof in ESBLsisolatesthethird of epidemic hospital Wuhanare dataare for city investigated．These importantimplementing antimicrobial appropriate a