肠炎沙门菌血清型、耐药特点和同源性分析.pdfVIP

·中文论著摘要· 肠炎沙门菌血清型、耐药特点及同源性分析 刖 舌 沙门菌是一类危害人和动物健康的重要致病菌，广泛存在于自然界，至今已 经发现的血清型有2579种。不同血清型致病力明显不同，其中伤寒和副伤寒沙门 菌可引起严重症状，如伤寒和副伤寒等肠热症，甚至可引起败血症导致死亡。而 非伤寒沙门菌引起的许多公共卫生事件被各种传媒广泛报道而影响到全球范围的 相关食品贸易。肠炎沙门菌是非伤寒沙门菌中常见的血清型之一，是造成感染性 腹泻病例的优势茵型。 目前，人群中喹诺酮类和头孢菌素耐药的沙门菌，尤其是多重耐药的沙门菌 在世界各地陆续被报道，这类细菌常出现氟喹诺酮类和头孢菌素药物耐药性上升， 容易导致临床治疗时间延长，复发感染，发病率和死亡率增高。监测肠炎沙门菌 的耐药性，对人类感染肠炎沙门菌的预防和控制具有重大意义。 DNA大限制性片段分析是用限制性内切酶酶切基因组DNA，产生少量限制 凝胶电泳(pulsed．field gel 将来自病人或食品样本中细菌的PFGE结果进行比较，根据来自同一亲代的个体 具有共同的遗传物质，可在PFGE试验中表现出相同的指纹图谱这一原理，确定 致病菌的亲缘关系，追溯共同的致病食品源头。 实验方法 1．鉴定沙门菌属血清分型 2 采用自动化分析仪VITEK Compact鉴定沙门菌属，血清凝集法确定肠炎沙 门菌血清型。针对沙门菌鞭毛抗原脆弱易缺失等特点，采用位相诱导法进行鞭毛 抗原凝集，确定具体血清型。 2．肠炎沙门菌的耐药性 琼脂稀释法测定氨苄西林、萘啶酸、氯霉素、复方新诺明、头孢噻肟和头孢 他啶的最小抑菌浓度(MIC)，分析耐药特点。 3．肠炎沙门菌的同源性 PFGE对肠炎沙门菌进行分子分型检测，进行同源性分析。分别取肠炎沙门菌 单克隆菌株用低熔点胶灌模，蛋白酶K50℃消化2h，60UXbaI、30UBlnI和30U 4h，1．0％的脉冲场凝胶电泳仪专用胶，电泳仪为美国 SpeI消化细菌染色体DNA Bio．Rad公司生产的CHEF．Mapper 18h、20h。 三日结 禾果 1．肠炎沙门菌血清型 为(6，7：c：l，5)：2株婴儿沙门菌(3．39％)，血清型为(6，7，14：r：1，5)；l株蒙得维的 鉴定出血清型3株(5．08％)。 2．肠炎沙门菌耐药特点 3l株肠炎沙门菌对萘啶酸耐药率最高为96．77％，其次耐药率较高的是氨苄西林 药或中介为6．45％，全部肠炎沙门菌均对头孢他啶均不耐药。4株(12．90％)肠炎沙 门菌同时对3种抗菌药物耐药，l株(3．23％)同时对4种抗菌药物耐药。 3．肠炎沙门菌的同源性分析 31株XbaI酶切共区分5种不同带型，各带型条带数相差小于等于3条，可 视为同一带型。BlnI酶切共区分6种不同带型，各带型条带数相差l~4条，非同 2 带型，各带型条带数相差1“条，非同一带型，但相似系数在0．850--0．974之间， 相似性很高。 结论 1．沙门菌的血清型表现为多样性，肠炎沙门菌是我院感染性腹泻的主要血清型。 2．肠炎沙门菌对萘啶酸耐药率极高，而我院也出现多株多重耐药的肠炎沙门菌。 3．三种限制性内切酶结合，共区分11种不同带型，更有效的区分PFGE型别，提 高了方法的分辨率。 关键词 沙门菌，肠炎； 耐药性，细菌； 电泳，凝胶，脉冲场 3 ·英文论著摘要· of resistant Analysis serotype、antimicrobial and ofSalmonella geneti