肠道亚健康人群结肠粘膜蛋白质组学探究.pdfVIP

摘要 tractsub．health 目的：研究肠道亚健康便秘(intestinal bowelnot does constipation)及大便不成形(theshape)人群结肠粘膜 蛋白质的变化特征，并对部分差异蛋白质进行鉴定与功能分析，为探 讨肠道亚健康便秘及大便不成形人群的结肠粘膜改变机制提供理论 依据。 方法：肠道亚健康便秘20例，诊断均符合便秘罗马III标准，大 便不成形患者20例，正常对照组20例。分别在进行结肠镜检查时， 直视下取结肠粘膜，立即置于含O．1％苯甲基磺酰氟的冰盐水中洗净， gel Master2D 仪获取图像。使用Image Elite分析软件进行图像分析，筛 选出在亚健康便秘组与大便不成形组中表达有明显差异的蛋白质点， 应用生物质谱，蛋白质库等技术对部分表达差异的蛋白质进行鉴定、 功能和临床意义分析。 结果：正常对照组平均胶蛋白斑点数为535，便秘组平均胶蛋白 斑点数为501，与正常对照组平均胶匹配点数为324，匹配率为 64．67％；175个蛋白质点的表达量存在显著差异，挑选20个蛋白点 进行蛋白鉴定，鉴定出17个点，其中lO个蛋白点表达上调，7个蛋 白点表达下调。表达上调的蛋白质经鉴定为唾液酸酶、多聚胞嘧啶结 合蛋白1、3．磷酸甘油醛脱氢酶、脂酶D、碳酸酐酶I、类胰蛋白酶D．1、 蛋白酶体激活复合物亚基2、MAWD结合蛋白、磷脂结合蛋白I和 肽基脯氨酰顺反异构酶。表达下调的蛋白质点经鉴定为细胞角蛋白8、 乙醛脱氢酶1、锌指蛋白658、硫氧还蛋白样蛋白、D．肌动蛋白、硫 代硫酸硫转移酶、YWHAZ蛋白。大便不成形组平均胶蛋白斑点数为 个蛋白质点的表达量存在显著差异，挑选10个蛋白点进行蛋白鉴定， 鉴定出8个点，其中3个蛋白点表达上调，5个蛋白点表达下调。 表达上调的蛋白质经鉴定为碳酸酐酶I、膜联蛋白A5和亲环素A。 表达下调的蛋白质点经鉴定为醛脱氢酶A1、线粒体羟甲基辅酶A合 成酶、热休克蛋白8、丫．肌动蛋白和载脂蛋白A．I。 结论：1、应用双向凝胶电泳方法成功得到了肠道亚健康便秘和 大便不成形人群结肠黏膜组织蛋白质组表达图谱。 2、肠道亚健康便秘组中鉴定出17个蛋白质。有10个蛋白质点 表达明显上调，7个蛋白质点表达显著下调。其中锌指蛋白658、13． 肌动蛋白、YWHAZ蛋白和硫代硫酸硫转移酶可能与亚健康便秘的发 生、发展有关；乙醛脱氢酶l、肽基脯氨酰顺反异构酶、细胞角蛋白 8及碳酸酐酶I可能与长期便秘向肿瘤发展有关。 3、肠道亚健康大便不成形组中鉴定出8个蛋白质。其中3个蛋 白质点表达明显上调，5个蛋白质点表达明显下调。 关键词： 结肠粘膜，亚健康，便秘，大便不成形，蛋白质组学 Ⅱ ABSTRACT andidentificationthecolonicmucosa objectiveComparing differencebetweenintestinaltractsub-health proteomicprofiles does theoretical andthebowelnot constipation shapepeople，providing for the ofintestinalmucosainintestinal basisunderstandingpathogenesis sub-health andtheboweldoesnot tract constipation