肠源性感染小鼠模型中主要危险因素的作用探析.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 Abstract……………………………………………………………………………………………”4 前言………………………………………………………………………………………………8 技术路线及实验设计……………………………………………………10 材料与方法…………………………………………………………11 结果………………………………………………………………………………20 分析与讨论………………………………………………………………··39 结论……………………………………………………………………………………………·43 参考文献…………………………………………………………………一44 中英文缩写………………………………………………………………．．48 作者简历及攻读学位期间发表的论文…………………………………49 致谢…………………………………………………………………………·50 综 述……………………………………………………………………………………………·51 参考文献…………………………………………………………………一57 万方数据 温州医科大学硕士学位沦文 肠源性感染小鼠模型中主要危险因素的作用分析 81 1删蚪科Y29141 中文摘要 目的 研究广谱抗生素、化疗药物及外源真菌对ICR小鼠肠黏膜机械屏障、生物屏 障和免疫屏障的影响作用。 方法 1．实验处理：64只6周龄ICR雌性小鼠随机分为8组，每组8只。分组设置 为A组：无处理对照组；B组：单纯使用广谱抗生素溶液组(1mg／ml盐酸 万古霉素、tmg／ml盐酸克林霉素和0．2mg／ml硫酸庆大霉素混合溶液，13服； 5．氟尿 共18天)：C组：单纯使用化疗药物组(实验第8天时，200mg／kg 嘧啶，尾静脉注射，一次)；D组：单纯白色念珠菌灌胃组(实验第9、10 两天分别给予lxl09／ml白色念珠菌悬液灌胃0．3ml，共两次)；E组：使用 抗生素及化疗药物组(抗生素使用同B组，化疗药物使用同C组)；F组： 使用抗生素并白色念珠菌灌胃组(抗生素使用同B组，白色念珠菌灌胃同D 组)；G组：使用化疗药物并白色念珠菌灌胃组(化疗药物使用同C组，白 色念珠菌灌胃同D组)；H组：使用抗生素及化疗药物并白色念珠菌灌胃组 (抗生素使用同B组，化疗药物使用同C组，白色念珠菌灌胃同D组)。 2．观测指标：在处理过程中收集各组小鼠不同阶段的粪便颗粒进行涂片革兰染 色观察菌群大致结构；并对给予白色念珠菌灌胃组小鼠(D、F、G、H组) 的粪便进行白色念珠菌培养计数，研究四组小鼠肠道内白色念珠菌含量的变 化。记录小鼠在0天(开始阶段)、7天(抗生素饮用处理后)、10天(白 色念珠茵灌胃处理后)和18天(处死前)的体重，并全程记录不同组小鼠 死亡情况；在实验第18天时处死全部组小鼠，分别对各组小鼠肺、肝、肾 进行研磨匀浆，对匀浆中主要细菌和白色念珠菌进行菌落培养计数，比较各 组小鼠细菌和真菌感染率；对脏器切片行苏木精一伊红染色法(HE)染色， 观察感染组小鼠各脏器的病理变化；采集处死后各组小鼠盲肠粪便，提取粪 便全基因组DNA，利用qPCR法对肠道中总细菌、肠杆菌属、双歧杆菌属、 肠球菌属、总真菌含量进行定量并对B／E值进行比较分析；采集处死时小鼠 万方数据