芳香化酶在SD1G93A转基因鼠腰段脊髓的表达特征.pdf

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………3 英文缩写…………………………………………………………………6 研究论文芳香化酶在SODlG93A转基因鼠腰段脊髓的表达特征 前言…………………………………………………………………1／ 日U舌…‘’…………’……‘。……。…………………………………… 材料与方法…………………………………………………………7 结果………………………………………………………………’12 附图………………………………………………………………’14 讨论………………………………………………………………‘19 结论………………………………………………………………‘22 参考文献…………………………………………………………’23 综述芳香化酶与中枢神经系统疾病………………………………·30 致谢……………………………………………………………………·。49 个人简历………………………………………………………………‘50 万方数据 中文摘要 芳香化酶在SODl嘲转基因鼠腰段脊髓的表达特征 摘 要 lateral 目的：肌萎缩侧索硬化(amyotrophic 成年发病的中枢神经系统神经变性疾病，流行病学研究表明其患病率在绝 经期前男性高于女性，绝经期后男女发病比例没有明显区别。一项关于 ALS动物模型行为学的研究也表明卵巢完整雌鼠比卵巢切除雌鼠生存期 延长。这些结果说明女性性激素与ALS的发病和疾病进展有关。雌激素 分为循环来源雌激素和组织局部合成雌激素，无论哪种来源雌激素，芳香 化酶都是必不可少的，它是雌激素合成过程的关键酶，参与雌激素合成的 最后一步，将16．羟睾酮、睾酮、雄烯二酮分别转化为雌三醇、雌二醇和 雌酮。生理条件下，芳香化酶在卵巢、胎盘、睾丸、前列腺、脂肪组织、 骨骼、大脑均有表达。在中枢神经系统，脑芳香化酶的作用不仅仅局限于 介导性别分化、调节生殖行为和神经内分泌应答，它还能通过增加损伤部 位雌激素的合成从而起到神经保护的作用。许多实验证实大脑在正常情况 下仅有神经元表达芳香化酶，胶质细胞不表达，在各种损伤刺激后，星形 胶质细胞激活并开始表达芳香化酶，同时伴随芳香化酶活性的升高。在阿 尔茨海默病、帕金森病、缺血性卒中动物模型的研究中均发现组织局部的 芳香化酶能够发挥神经保护作用。然而关于芳香化酶在脊髓表达的报道少 见，芳香化酶在ALS动物模型中不同疾病阶段的表达特征也未有相关研 究。鉴于ALS与年龄性别的关系，本实验旨在观察芳香化酶在家族性肌 萎缩侧索硬化动物模型腰段脊髓前角的表达特征，为进一步研究雌激素在 ALS中的神经保护作用提供基础。 方法： 1动物模型及分组 繁殖并饲养家族性肌萎缩侧索硬化动物模型即经聚合酶链反应 chain (polymerase 发病前期、发病期、终末期不同时期雌各5只。对照组为同窝、同月龄非 SODlG93A转基因雌性小鼠。 2取材 万方数据 中文摘要 用10％水合氯醛350mg／kg腹腔注射麻醉后，打开胸腔暴露心脏，经 心脏灌注4％多聚甲醛20min以对组织进行固定，取出小鼠脑和脊髓组织， 以4％多聚甲醛固定48h。 3免疫组织化学染色 将固定好的腰段脊髓震荡切片成20mn厚，利用免疫组织化学染色的 方法显示芳香化酶在雌性SoDlG93A转基因阳性及阴性小鼠腰段脊髓前角 的表达特征。 4免疫荧光染色 将固定好的腰段脊髓震荡切片成20pro厚，