钙调神经磷酸酶在大鼠血管平滑肌细胞钙化中的影响.pdfVIP

Y1900508 目 录 中文摘要……………………………………………………………………·1 英文摘要……………………………………………………………………‘4 研究论文钙调神经磷酸酶在大鼠血管平滑肌细胞钙化中的作用 前言……………………………………………………………………………………………8 日lj舌……………………………………………………………………………………………石 材料与方法……………………………………………………………·8 结果…………………………………………………………………………………………．．14 附图………………………………………………………………………17 附表………………………………………………………………………………………一24 讨{仑…………………………………………………………………………………………一26 结论…………………………………………………………………………………………“32 参考文献………………………………………………………………32 综述钙调神经磷酸酶信号转导通路的生物学效应……………………37 致谢…………………………………………………………………………·48 个人简历……………………………………………………………………49 中文摘要 钙调神经磷酸酶在大鼠血管平滑肌细胞钙化中的作用 摘 要 目的：血管钙化是由细胞和分子参与的、类似于骨形成的主动过程。当 smoothmuscle 调节血管平滑肌细胞(vascular 号系统出现紊乱时，VSMCs维持增殖表型或向成软骨细胞、成骨细胞、 脂肪细胞等间质细胞系转化，导致动脉粥样硬化、血管钙化等血管性疾病， 因此，VSMCs是联系骨代谢和血管钙化的细胞学基础之一。深入研究 VSMCs钙化的发病机制，预防、延缓或逆转细胞钙化的发生，具有重要 的临床意义。 组织分布广泛，使底物NFATs去磷酸化而易位入核，激活下游基因转录， 参与多种细胞功能的调节。研究证实CaN在多个系统内产生各种生物学 效应、分泌各种细胞因子。CaN不但参与成骨细胞及破骨细胞分化、成 骨作用，而且还在VSMCs增殖及功能维持中起到重要作用，是否参与 VSMCs钙化的调节过程，目前国内外尚未见有报道。 研究表明，高磷能以时间和剂量依赖性方式诱导VSMCs钙化。本试 量，碱性磷酸酶(A1kaline 临床防治提供新的思路。 代培养后，随机分为3组，A组：对照组；B组：钙化组：C组：钙化+ 的CsA，分别培养6天，每3天换液一次，于第6天收集细胞。 中文摘要 Blot测定C 将收集的各组细胞Westem a_NB蛋白、实时荧光定量反转 a_N 活性、比色法测定ALP活性、光镜下观察茜素红染色大鼠VSMCs钙化 的情况。所有数据均以均数士标准差(i士s)表示，运用SPSS17．O统计软 件，对计量资料进行正态性检验及方差齐性检验，组间资料比较应用单因 素方差分析，两两比较应用LSD．t检验，尸O．05即有统计学意义。 结果： (1)茜素红染色结果示对照组大鼠VSMCs呈梭形，排列整 齐，未见钙化点；钙化组大鼠VSMCs呈梭形或多角形，排列紊乱，可见 大量褐色钙化点；CsA组大鼠VSMCs呈梭形或多角形，排列紊乱，也可 见大量褐色钙化点。 (2)ELISA法测定大鼠VSMCsCaN活性表达结果 (3)ELISA法测定大鼠VSMCsCa2+定量分析结果为钙化组(9．01± 有统计学意义。 (4)实时荧光定量反转录PCR法测定C心mmRNA表 达结果为钙化组C心m 有统计学意义。(5)Westemblot测定CaNB蛋白定量结果为钙化组C心m 表达(69．1 化组(69．11．土2．51)表达显著减少(尺0．0