非小细胞肺癌中淋巴细胞浸润及CTGF表达与预后的关系.pdfVIP

摘要 非小细胞肺癌中淋巴细胞浸润和CTGF表达 与预后的关系 研究生 尚可 导师 李醒亚 郑州大学第一附属医院肿瘤内科 郑州450052 摘要 背景与目的 肺癌已经成为世界上最常见的肿瘤死因之一，肺癌的主要组织学类型是非 小细胞肺癌(non．small．eellcancer，NSCLC)，包括鳞癌、腺癌和大细胞癌， lung 其次为小细胞肺癌。数据显示肺癌的发病率和死亡率居于世界首位。尽管手术、 化疗和放疗的联合治疗近年来不断发展，但I-IIIA期的NSCLC患者经过手术及 术后治疗，还是有大约65％的病人在术后2年内死亡或者发生远处转移，肺癌的 5年生存率也仅在10％左右徘徊，严重危害人类的健康。 目前的研究表明，肿瘤发生发展不但和肿瘤本身恶性生物学行为有关，肿 瘤微环境中基质成分的改变也发挥重要的作用。肿瘤微环境是由癌细胞和多种 基质细胞、细胞因子、趋化因子等组成。其中基质细胞包括成纤维细胞、免疫 细胞、内皮细胞、骨髓来源未成熟细胞等；许多肿瘤相关的免疫细胞都是一把 双刃剑，譬如已经了解的巨噬细胞、树突细胞和细胞毒性T细胞，一方面，这 些免疫细胞可以识别肿瘤相关抗原，激活细胞毒性T细胞，发挥抗肿瘤效应； 另一方面，这些免疫细胞还能建立免疫耐受，甚至通过增加血管生成和侵犯细 胞外基质而促进肿瘤生长和转移。肿瘤组织局部免疫微环境的变化与患者术后 复发和长期生存等关系密切，其中肿瘤组织中浸润的T淋巴细胞在很多肿瘤中 的作用已经得到验证，并认为淋巴细胞的浸润能够减少术后复发。虽然肿瘤周 摘要 围存在淋巴细胞的浸润，但肿瘤仍能生长提示肿瘤的局部免疫功能可能失衡。 目前关于T淋巴细胞在NSCLC肿瘤局部表达及其对预后关系的报道还比较少。 tissue 结缔组织生长因子(connectivegrowth CTGF、Nov)家族的一种分泌型蛋白，涉及到多种生物学过程，譬如：血管生成、 粘附、迁移和细胞凋亡等。有研究证明，CCN蛋白参与肿瘤发生过程，在多种肿 瘤中发现CCN蛋白上调或下调表达，提示CCN蛋白表达对肿瘤起正向或负向调 节作用。CCN家族蛋白是一种多模块结构，其在不同的肿瘤组织中有着不同的生 物学行为及功能。近年来的研究发现，CTGF与细胞外基质相互作用，调节多种 组织恶性肿瘤的发生发展、血管生成及浸润转移，CTGF的表达水平与肿瘤的预 后及术后复发密切相关。而有关CTGF表达水平及其对NSCLC预后关系的研究更 是鲜有报道。 本研究采用免疫组织化学染色法检测NSCLC肿瘤组织中T淋巴细胞浸润及 CTGF的表达情况，并分析二者与预后的关系。 ．r· 材料与方法 术切除的非小细胞肺癌标本131例，均经术后病理确诊。所有病例术前均未接 受化放疗治疗，且无明显心、肾、肝及神经系统等影响生命的疾患。术后开始 随访，截止日期为2010年8月31日；生存时间以月为单位，计算自手术之日 至死亡或最后随访时间。并记录患者的吸烟史及家族史等资料。 实验方法和结果判定所有切除标本首先用10％甲醛溶液固定，常规石蜡 包埋，4|lm连续切片进行SP免疫组织化学检测。SP试剂盒、DAB显色试剂盒、 鼠抗人CD3单克隆抗体、鼠抗人CTGF单克隆抗体均为北京中杉金桥生物技术 公司产品。操作步骤参照试剂盒说明书进行。以PBS代替一抗作为阴性对照。 CD3蛋白为胞膜着色，染色为棕黄色或棕褐色颗粒，阳性染色细胞20％mp为低表 达，阳性染色细胞≥20％则为高表达。CTGF蛋白为胞膜和胞浆着色，染色为棕黄 色或棕褐色颗粒，阳性染色细胞1096即为低表达，阳性染色细胞≥10％则为高表 达。 · 统计学处理 统计学分析采用SPSS17．0软件分别进行X2检验、 学意义。 Il