骨桥蛋白在实验性变态反应性脑脊髓炎发病中作用的探究.pdfVIP

骨桥蛋白在实验性变态反应性脑脊髓炎发病中作用的研究 摘 要 炎(experimentalallergic nervous 疫学机制，探讨阿托伐他汀对EAE大鼠中枢神经系统(central 汀组和小剂量阿托伐他汀组，每组各lO只。采用粗制髓鞘碱性蛋白(myelin basic 白造模之日开始，小剂量阿托伐他汀组每日灌胃阿托伐他汀lmg／kg．d，大剂 每日灌胃等体积生理盐水，直至整个实验结束。EAE对照组、大小剂量阿 托伐他汀组连续3天症状评分无加重或四肢瘫痪、死亡时作为EAE发病高 峰期。记录发病大鼠的潜伏期、进展期和高峰期神经功能障碍评分；于发病 高峰期处死大鼠，正常对照组4周后处死，留取大鼠脑及脊髓组织，经处理 切片行HE染色，光学显微镜下观察病理变化；免疫组化技术和平均光密度 测定法检测各组大鼠脑和脊髓白质组织内OPN和CD44的表达情况；留取 imrnunosorbent 各组大鼠眶静脉血，用酶联免疫吸附(enzyme—linked assay， bloodmononuclear ELISA)法检测外周血单个核细胞(peripheralcell，PBMC) l 发病。EAE对照组及大、小剂量阿托伐他汀组均有不同程度发病。EAE对 较EAE对照组延长，差异有统计学意义(尸0．05)，大剂量阿托伐他汀组潜 伏期(19．4±2．2天)较EAE对照组及小剂量阿托伐他汀组均明显延长 量阿托伐他汀组比较，差异没有统计学意义(PO．05)；EAE对照组发病高 峰期神经功能障碍评分为3．6±0．5分，小剂量阿托伐他汀组神经功能障碍评 组、大小剂量阿托伐他汀组大鼠脑及脊髓病理学改变：正常对照组大鼠脑和 脊髓无异常。EAE对照组大鼠高峰期可见脑及脊髓实质内小血管充血，血 管周围主要是小静脉周围有大量炎性细胞浸润，主要为单个核细胞浸润，形 成“袖套状改变，血管周围白质明显脱髓鞘改变。而小剂量阿托伐他汀组 病理改变较轻，大剂量组最轻。(3)EAE对照组、大小剂量阿托伐他汀组 脑干、脊髓白质及灰白质交界的小血管周围。OPN主要分布在神经细胞胞 核，部分胞浆亦有表达；CD44主要分布在神经细胞胞浆，两者高表达部位 的炎症表现较重。正常对照组大鼠CNS内未发现OPN、CD44阳性细胞； EAE对照组大鼠CNS白质及灰白质交界处可见大量阳性细胞，棕黄色颗粒 2 浓染，着色深；大剂量阿托伐他汀组和小剂量阿托伐他汀组大鼠CNS内仅 有少量散在淡染的阳性细胞，小剂量阿托伐他汀组CD44表达高于大剂量阿 托伐他汀组。图像分析结果显示，与大剂量阿托伐他汀组及小剂量阿托伐他 组较正常对照组明显升高(尸0．01)，大、小剂量阿托伐他汀组分泌的IFN吖 ji (PO．01)，大剂量阿托伐他汀组较小剂量阿托伐他汀组下降更明显(P ’ 47．064-7．5 发病潜伏期呈负相关(PO．01)，与发病进展期、高峰期神经功能障碍评分呈 1 能障碍评分呈正相关(尸D．01)。EAE对照组及大小剂量阿托伐他汀组发病 对照组及大小剂量阿托伐他汀组发病高峰期OPN与CD44表达呈相正关 型，EAE大鼠神经功能障碍明显，脑和脊髓血管周围炎性细胞浸润、白质 脱髓鞘，说明本法造模成功，可靠，稳定。2．EAE大鼠体内存在着免疫失 大鼠发病期OPN表达上调，OPN表达与EAE潜伏期呈负相关，与进展期、 神经功能障碍评分呈正相关，经阿托伐他汀治疗后降低，提示OPN与EAE 后发挥细胞信