鼻咽癌高癌家系外周血单个核细胞蛋白质组学探究.pdfVIP

鼻咽癌高癌家系外周血单个核细胞蛋白质组学研究 。‘’· 中文摘要 目的：利用蛋白质组学方法建立分辨率高和重复性好的鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患 b100d 者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞(pe邱hefal monorluclear cells，PBMC)的双向凝胶电泳㈣砌inlensionalgel 图谱，识别鉴定其差异表达的蛋白质。寻找鼻咽癌高癌家系鼻咽癌早期诊断、癌变 机制、治疗及预后监测的外周血特异性分子标志物。 方法：(1)采用密度梯度离心法分离鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系 成员及健康对照组静脉血PBMC，用改良细胞裂解液裂解PBMC，抽取其总蛋白并 利用蛋白质组学专用2．DE蛋白检测试剂盒测定总蛋白含量。 pH3-10NL梯度(而mobil泣ed 聚焦((isoelectric 二烷基磺酸钠聚丙烯酞胺凝胶电泳(sodiumdodecyl gel 成像，接着采用PDQueSt图像分析软件对2．DE凝胶图谱依次进行蛋白质斑点检测、 背景消减、标准化、匹配、建立平均凝胶(matchset gel)、比较差异等分析并识别差 异表达的蛋白质。选取部分差异表达的蛋白质应用基质辅助激光解吸电离飞行时间 tiIneof m硒s 质谱(matriX-酗sistedl弱盯desotption／ionizationnight spec臼．0me缸y， - 点· (2)得到了分辨率较高、重复性较好的鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者，鼻咽癌高癌家系 成员及健康对照PBMC双向凝胶电泳图谱。鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者，鼻咽癌高 1．87土0．23mm及2．03土0．22删n。 (3)鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照PBMC凝胶的差异 蛋白点，表达增强的个数分别是26土5，27土4及21士5，表达量降低的个数分别 差2倍以上的差异蛋白质点共22个，对其进行质谱分析，鉴定出19个蛋白质，在 鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者及鼻咽癌高癌家系成员PBMC中表达明显增强的有热 Shock 休克蛋白质0eat 鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者及鼻咽癌高癌家系成员PBMC中低表达。这些差异蛋白 质点主要为蛋白质合成与分解、分子伴侣、抗氧化应激、三大代谢相关酶类、细胞 结构相关蛋白质以及信号传导相关蛋白质等六类。 结论：(1)成功地建立了用蛋白质组学技术分析PBMc的实验方法。 (2)建立了分辨率高且重复性较好的鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成 员及健康对照PBMC双向凝胶电泳图谱。 (3)鉴定出差异表达蛋白质19个，表达明显增强有10个，明显下降的有9个，其中 HSP27、Protein 变机制、治疗及预后监测的外周血特异性分子标志物。 l S00·A9：Prohibitin 2 of ceUsin A on bloodMononucIear study human‘peripheral proteollle FamiliaI Carcinoma Nasopharyng姐l ABSTRACT ective：Toe灿lish廿le铆。以inlensional obj b100d mononucle缸∞lls(PBMC)in 耐pheral n勰ophaD，ngeal f．锄ilial