三氧化二砷联合足叶乙甙对慢性髓系白血病细胞株(K562)生长的作用.pdfVIP

中文摘要 三氧化二砷联合足叶乙甙对慢性髓系白血病 细胞株(K562)生长的影响 摘 要 目的：慢性髓系白血病细胞株(K562)的细胞遗传学特征主要表现 酶活性，通过多种信号途径，使K562细胞过度增殖。 三氧化二砷为一种砷剂，对恶性肿瘤，尤其是血液系统恶性肿瘤，如 急性早幼粒细胞白血病有极佳的治疗效果。三氧化二砷主要是通过抑制肿 瘤细胞生长、诱导肿瘤细胞凋亡和诱导肿瘤细胞部分分化而达到抗肿瘤作 用，也可以通过抑制肿瘤血管生成而起到抗肿瘤效果。 足叶乙甙是细胞周期特异性抗肿瘤药物，具有杀伤肿瘤细胞的细胞毒 作用。但足叶乙甙作为一个细胞调亡诱导剂，也具有诱导细胞凋亡作用。 本研究通过三氧化二砷联合足叶乙甙对慢性髓系白血病细胞(K562) 生长的影响，探讨三氧化二砷和足叶乙甙的联合作用对K562细胞生长抑 制的作用。从而为三氧化二砷和足叶乙甙联合治疗慢性髓系白血病提供理 论依据。 方法：应用细胞培养技术培养慢性髓系白血病细胞(K562)，观察三 氧化二砷和足叶乙甙对K562细胞生长的影响。采用台盼蓝拒染法和MTT 比色法检测K562细胞生长增殖率和生长抑制率；应用AO／EBr荧光染色 和流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞周期。 结果：l 及坏死。另外，VP．16作用后，细胞体积较对照明显增大，随时间延长更 加明显。 2台盼蓝拒染法检测K562细胞生长增殖率：坏死细胞着色变蓝。 2．1 显著降低；相同作用时间，随As203浓度增加，细胞增殖率明显降低。各 组与对照比较均差异，有统计学意义。 2．2 中文摘要 率降低；相同作用时间，随浓度增加，细胞增殖率降低，浓度越高越显著。 各组与对照比较均差异，有统计学意义。 2．3 差异，有统计学意义。 ． 3MTT比色法测定K562细胞生长抑制率： 3．1 学意义。根据结果判断较佳效应时间72h，IC50为1．00I_tmol／L。 3．2 明显；72h细胞生长抑制显著。72h 之间。各组与对照比较均差异，有统计学意义。 3-3 随As203浓度增加，细胞生长抑制率也升高。各组与对照比较均差异，有 统计学意义。 4荧光染色检测K562细胞作用72h凋亡率：活细胞核呈黄绿色均匀荧光； 凋亡细胞核呈黄绿色致密浓聚在核膜内侧、胞膜呈泡状膨出；坏死细胞呈 橙红色荧光。 4．1 对照比较(p0．01)各组与对照比较均差异，有统计学意义。 4．2 (po．05)各组与对照比较均差异，有统计学意义。 4．3 浓度增加，细胞凋亡率增加；相同浓度VP．16，细胞凋亡率随As203浓度 VP．16， VP-16联合2．50、5．00、10．00Itmol／LAs203，细胞凋 (pO．05)；1．251ag／ml 中文摘要 比较均差异，有统计学意义。 5流式细胞仪检测K562细胞作用72h细胞周期： 5．1 S期细胞逐渐减少。 5．2 例明显增加，异倍体中G0／G1期比例显著升高(90％)；二倍体比例明 显减少，二倍体中G0／GI期比例逐步增高，S期细胞逐渐减少。 ． 5．3 升高(90％)：二倍体比例减少，二倍体中G0／G1期比例逐步增高，S期 细胞逐渐减少。相同浓度VP．16随As203浓度增加，异倍体比例增加，异 期比例逐步增高，S期细胞逐渐减少。 结论： 1在一定的浓度和时间范围内，三氧化二砷显著抑制K562细胞株生长， 其抑制作用与剂量、时间呈依赖性。 2在一定的浓度和时间范围内，足叶乙甙明显抑制K562细胞株生长，其 抑制作用与剂量、时间呈依赖性。 3三氧化二砷和足叶乙甙联合应用对K562细胞株的生长抑制作用具有协 同作用。 4三氧化二砷联合足叶乙甙在彼此皆使用超低剂量的情况下抑制K562细 胞株生长，使用超低