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三维培养肿瘤细胞耐药性和放射敏感性的研究
三维培养肿瘤细胞耐药性及放射敏感性的研究 中文摘要
三维培养肿瘤细胞耐药性及放射敏感性的研究
中文摘要
目的
建立三维细胞模型,观察其细胞形态学变化,研究三维培养对肿瘤细胞耐药性及
放射敏感性的影响,并比较与单层培养的差异,进一步探讨其应用前景。
方法
1、建立体外人U87脑胶质瘤细胞、人HDF成纤维细胞、共培养相同浓度两种
3D 2D
细胞的 和 培养模型,荧光相差显微镜观察并记录其形态学变化。
2 3D 2D
、分别给予不同剂量照射和不同浓度药物处理 及 细胞,荧光相差显微镜
3D 2D MTT
观察 及 形态学变化以及迁移增殖能力, 法测定各组细胞存活率。
结果
1 2D HDF U87
、 培养人 成纤维细胞和共培养细胞呈单层平面分布,人 脑胶质瘤
3D U87 3D
细胞可在平面聚集成点, 培养显示人 脑胶质瘤细胞形成团状聚集, 共培
养细胞显示聚集形态比较贴近单纯培养人HDF成纤维细胞走向。
2 2D 3D
、 培养细胞随着药物浓度增加,形态明显改变及部分细胞脱离培养皿,
细胞培养相同浓度药物则无明显变化甚至人U87脑胶质瘤细胞继续培养依旧能形成
3D MTT 10µmol/L 2D 3D
结构, 显示在 各组细胞 及 培养存活率差异不明显,随着浓
3D 2D
度增加各组细胞 较 培养存活率明显升高。
3 2D U87 HDF Co-culture 2Gy
、培养六天观察: 培养 、 、 三组细胞予 辐照组细胞
8Gy U87 12Gy
形态基本正常; 组人 脑胶质瘤细胞形态萎缩且多数细胞死亡; 组细胞
3D 2Gy 4Gy 8Gy 12Gy
多呈碎片。 培养结果显示 、 、 及 组和对照组形态无明显区别,
12Gy MTT HDF 2Gy 3D 2D
但 组增殖能力下降。 结果显示除人 成纤维细胞 组 和 培
P=0.05 3D P0.05
养无统计学差异 ( ),其它组 细胞存活率明显高于单层培养细胞 ( )。
3D U87 2Gy 4Gy
进一步延长时间培养结果显示 培养人 脑胶质瘤细胞在对照组、 、 、
8Gy组均能形成三维结构,随着剂量增
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