人乳头瘤病毒整合状态及宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的相关性研究.pdfVIP

摘 要 目的： 1. 探讨宫颈上皮内瘤变（Cervical Intraepithelial Neoplasia，CIN）及宫颈癌 （Cervical Ccancer，CC）组织中人乳头瘤病毒（Human Papillomaviruses，HPV） 的整合状态和基因型分布。 2. 探讨宫颈癌组织中HPV16和HPV58 的基因整合规律，整合位点分布及整合基因功 能，分析其整合与宫颈癌临床病理之间的联系。 方法： 收集2008年5月至2013年5月在青岛大学医学院附属医院行宫颈冷刀锥切术和宫 颈癌根治术并具有完整病例资料患者的病理组织蜡块共149例，通过全基因组测序 和高通量病毒整合检测方法，检测149例标本中HPV整合型别及其整合位点信息。 结果： 1. 149例宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者的平均年龄为42.30±7.49 岁，93例检测 到HPV 的整合，其平均年龄为41.34±6.84岁。＜45岁CIN及宫颈癌患者的HPV整 合率高于≥45岁患者。 2. 149例组织样本中，有93例发生了HPV 的整合，其整合率为62.42%，HPV整合 率随其病变严重程度加重而升高 （p＜0.01）。HPV在CIN3和宫颈癌中的整合率均明 显高于CIN1和CIN2 （p均＜0.01）。在93例发生整合的病例中，HR-HPV整合率为 83.87%，HR-HPV整合率随病变严重程度增加而升高（p＜0.01）。 3. 在149例宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织标本中前五种常见的整合基因型（根据整 合率递减）为：HPV16 （42.28%）,58 （20.13%），31 （18.12%），35 （16.11%）和33 （8.05%）；在35例CIN1标本中，依次为HPV58 （11.43%），52 （8.57%）和56/66/68 （均为5.71%）；在35例CIN2 标本中，依次为HPV16/58(均为14.29%)，33/66(均 为8.57%)和52 （5.71%）；43例CIN3组织标本中仅检测出4种基因型整合，依次为 HPV16 （65.12%），58 （16.28%），33 （6.98%）和31 （2.33%）；在36例宫颈癌组织 标本中，依次为HPV16 （80.56%），31 （69.44%），35 （66.67%），58 （38.89%）和51 （22.22%）。 4. 149例宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织标本中，检测到多种型别的HPV整合。宫颈 癌多重整合率达100%，明显高于CIN组织中多重整合率（p＜0.01）；在CIN 组织中， HPV 的多重整合率无明显变化趋势，与病变程度无相关性 （p＞0.05）。CIN 的HPV单 一整合率明显高于宫颈癌组织（p＜0.01）；在CIN 中，HPV 的单一整合率均高于多 重整合，且随病变程度的加重而升高（p＜0.05）。 5.HPV16在所有宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的整合率达42.28%，整合位点广泛分布 于1号到X染色体，其中1号，2号，4号，X和5号染色体上发生整合的样本数最 多。HPV 58在所有CIN及CC 中的整合率达20.13%，整合位点也广泛分布于1号到 X染色体，其中5号，9号，2号，3和4号染色体上发生整合的样本数最多。HPV 病毒断裂可发生在E6到LCR 中的任何基因，最常见的部位是L1和E1基因。在29 例检测到HPV 16整合组织中，有17例的整合发生在基因启动子区域，在14例HPV 58整合组织中，有 1例检测出启动子区域的整合，在所有的94个整合位点所在的 基因及其邻近基因中，不乏与肿瘤发生及免疫功能相关的基因。 6.HPV16和HPV58的整合均与宫颈癌的临床分期有关 （p均＜0.05）。当病理类型为鳞 癌，宫颈间质浸润深度≥1/2和淋巴血管间隙受累时，HPV16的整合率升高；当年龄 ≥50岁，组织学分化为中-低分化，宫颈间质浸润深度≥1/2，淋巴血管间隙受累和 淋巴结转移时，HPV58的整合率升高，虽然两种病毒的整合率在这些病理因素中均无 统计学意义，但仍提示病毒整合是以上临床病理因素可能的危险因素，而病毒多次 整合是宫颈间质浸润深度≥1/2和淋巴血管间隙受累可能的的高危因素。 结论： 1. HPV DNA整合更易发生于45岁以下的女性，故对于45岁以下宫颈上皮内瘤变及 宫颈癌患者应加强随访管理。 2. HPV和HR-HPV整合在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中均有发生，其整合率随其病变 严重程度的加重而升高，提示HPV整合在宫颈癌发生和发展过程中发挥重要作用。 宫颈癌组织中多