人参皂甙Rg3对凋亡调节蛋白FasLFas在乳腺癌MCF-7细胞表达的作用.pdfVIP

山西医科大学硕士论文 中文摘要 近年来，我国乳腺癌的发病率呈上升及年轻化趋势，并且成为女性发病率最高的恶性 肿瘤。20(R) –人参皂甙Rg3 （SPG-Rg3）是存在于天然药物人参中的一种四环三萜皂甙， 其抗肿瘤作用广受重视，但针对乳腺癌其抗肿瘤机制尚待研究。 目的：检测SPG-Rg3 对人乳腺癌MCF-7 细胞的生长抑制作用；检测SPG-Rg3 诱导MCF-7 细胞凋亡作用以及对MCF-7 细胞周期的影响；检测MCF-7 细胞中Fas 和FasL 的表达，并 分析其与细胞凋亡之间的相关性。 方法：人乳腺癌细胞MCF-7 细胞株分为空白对照组，实验对照组及SPG-Rg3 多个浓度组。 利用MTT 法分别检测24h 、48h 和72h SPG-Rg3 对MCF-7 细胞的抑制作用，并计算出48h 时IC50 ；流式细胞术检测人参皂甙Rg3 作用后MCF-7 细胞周期的变化；利用Annexin V-EGFP /PI 双染法，检测人参皂甙Rg3 诱导MCF-7 细胞凋亡情况和细胞周期变化；利用 免疫细胞化学染色检测MCF-7 细胞凋亡和Fas 和FasL 蛋白的表达情况的关系，并进一步 研究二者和细胞凋亡之间的相关性。 结果：1，MTT 结果显示，SPG-Rg3 作用24h 、48h 和72h 后，实验对照组和空白对照组间 差别无统计学意义，其余各组间差别均有统计学意义，且SPG-Rg3 作用48h 的IC50 为244.54 mg/L 。2 ，流式细胞学结果显示，300 μg/mL SPG-Rg3 作用MCF-7 48h 后，凋亡率明显高 于对照组(P0.01) ，且S 期细胞比率明显增加(P0.01) 。3，免疫细胞化学结果显示，300 μg/mL SPG-Rg3 能使MCF-7 的Fas 和FasL 蛋白表达增加(P0.01) 。 结论：SPG-Rg3 对乳腺癌MCF-7 细胞有明显诱导细胞凋亡作用，并能够上调Fas 和FasL 蛋白表达，故认为其诱导细胞凋亡机制可能与上调Fas 和FasL 蛋白表达有关。 关键词：20(R) –人参皂甙Rg3 ；乳腺肿瘤；凋亡；MCF-7 ；Fas ；FasL. III 山西医科大学硕士论文 Abstract In recent years, the incidence of breast cancer is rising and getting younger and younger. It becomes the female malignancy with highest incidence. 20(R)-ginsenoside Rg3 (SPG-Rg3) is tetracyclic triterpenoid saponin, present in a natural medicine Ginseng. The anti-tumor effect of the medicine is been pay widely attention, but the mechanism of anti-tumor in breast cancer is to be studied. Objective：To detect the growth inhibiting induced by 20(R)-ginsenoside Rg3 (SPG-Rg3) in human breast cancer MCF-7 cells; to detect the apoptosis induced by SPG-Rg3 in MCF-7 cells, and the effect on cell cycle of MCF-7 cells; to detect the expression of Fas and FasL in MCF-7 cells, and to analyse the correlation between apoptosis and the expr