全身放疗对黑色素瘤荷瘤小鼠肿瘤微环境中CD4+CD25+Foxp3+Treg及TGF-β1影响的实验研究.pdfVIP

中文摘要 全身放疗对黑色素瘤荷瘤小鼠肿瘤微环境中 摘 要 irradiation 目的：探讨全身放疗(Total TBI)对黑色素瘤荷瘤小 body 水平的影响，观察全身放疗对肿瘤免疫抑制微环境产生的影响；为干扰肿 瘤微环境基础上细胞免疫治疗的临床应用提供新的理论依据和实验数据。 黑色素瘤荷瘤鼠模型。以8只正常小鼠作为健康对照组，其余进行造模， 造模成功后，随机分成8组，每组8只。其中1组作为肿瘤对照组，其余 1l、13天取小鼠的脾脏、血清、肿瘤组织进行检测，采用流式细胞技术 Real．Time 表达水平及其变化。 结果： 时间的延长，出现逐渐降低，维持一段时间后有升高的的趋势，至照射后 中第5d(4．25±0．20％)、7d(4．00 CD4+CD25+FOXP3+／CD4+的比例显示出最低值。 中文摘要 血清TGF．131含量伴随着时间的变化，出现逐渐降低的趋势，并在低水平 持续一段时间，至照射后lid(18．15±0．39 ng／m1)明显低于荷瘤对照组 5d(38．154-1．10 ne=,／m1)进行比较后显示无统计 ng／rnl)、7d(35．43±1．61 ng／m1)、lld(18．154-0．39ng／m1)、13d(18．654-0．36ng／m1)进行两两比 较后无统计学差异(P0．05)，且均处于低含量水平，其中第lld血清 TGF一131含量显示出最低值。 3．用Real-Time 对表达水平变化。结果显示：①以荷瘤对照组小鼠肿瘤组织中的 3d(O．651 计学差异(P0．05)，均处于低表达水平，其中第lld肿瘤组织中的 lmRNA相对表达水平最低。 TGF．IB 4．试验过程中各组小鼠TBI后未出现死亡例数。 ． 结论： 中的TGF．131的表达水平明显高于健康小鼠，提示荷瘤小鼠肿瘤微环境中 存在着免疫抑制因素，与以往的研究结果是相符的。 2．全身放疗的方法可以有效地干扰黑色素肿瘤荷瘤小鼠体内的肿瘤 微环境，给予全身7Gy的照射剂量后小鼠未出现死亡例数，能够明显降低 中文摘要 TGF．Bl的表达水平。 3．使用流式细胞技术能够较准确的反应脾脏中Treg水平，本实验显示 出在全身放疗的第l天肿瘤小鼠Treg比例就开始降低，第5天至第9天维持 1天开始升高。既 在低水平，且与健康小鼠体Treg水平无明显差异，第1 能打破肿瘤的免疫抑制微环境，又能不至于使Treg水平过低，引起自身免 疫反应。同时也为细胞过继免疫治疗提供了细胞回输的最佳时间。 PCR法检 4．用ELISA法检测血清中TGF．pl的含量，同时用Real-Time 平揭示了TGF．Bl的表达水平变化趋势，本实验两种方法的结果显示出该 变化趋势的一致性，以全身放疗的第11天TGF．pl的表达水平最低，并能 持续5天左右，既能有效地干扰肿瘤微环境，又能为细胞过继免疫治疗回 输的活化杀伤细胞提供充分的作用时间。 关键词：全身放疗；黑色素瘤；肿瘤微环境；转化生长因子-pl； CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞 英文摘要 TheEffectofTotal Irradiationin Body decreasing in