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2009年淮安市微生物实验室间质控结果研究[摘要] 目的：2009年11月参加淮安市疾控机构微生物实验室间质控活动，通过此次活动，发现存在问题，及时纠正错误，以便提高实验室微生物检测的能力和水平。方法：以《食品卫生微生物学检验》GB/T4789―2003（2008）为标准。结果：淮安市疾控中心2009年实验室间质控考核结果通报，本中心微生物质控结果为合格。结论：通过此次质控结果显示，本中心的微生物检测能力和水平有较显著的提高。 [关键词] 微生物检验；质量控制；实验室间比对试验 [中图分类号] R117[文献标识码] B [文章编号] 1674-4721（2010）11（a）-072-02 微生物检测实验室是疾病预防控制和卫生监督工作十分重要的技术支撑之一，主要承担着传染病监测与检测、卫生细菌学检测、医院消毒质量监测及消毒产品检测等方面的任务，技术手段涵盖微生物学、免疫学、分子生物学、细胞生物学等学科，其检测过程的质量控制尤为重要。开展微生物检测质量控制，参与实验室间比对和能力验证活动，对所接受盲样的分离鉴定工作能提高微生物检测人员的检测能力，同时也能提高微生物实验室检测各种样品的技术水平。因此，每年我们都要定期参加淮安市CDC的质控考核活动。现将2009年微生物实验室间的质控考核及检验结果报道如下： 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 质控样品：淮安市CDC下发的5 ml螺口塑料试和装半固体菌种一份，编号1号。 1.1.2 培养基：本次质控所用培养基为江苏博达微生物试剂有限公司及抗州天和微生物试剂有限公司提供，均在有效期内使用。自配试剂按GB/ T4789―2003配制。 1.1.3 诊断血清：沙门菌属诊断血清及O1群和O139霍乱弧菌诊断血清由兰州生物制品研究所生产，在有效期内使用。 1.1.4 质控标准菌株：乙型副伤寒沙门菌标准菌株，菌株号为50004、非O1群霍乱弧菌标准菌株，标准号为N92001。均购自江苏省博达微生物试剂有限公司。 1.2 方法 《食品卫生微生物学检验》GB/T4789―2003[1]、《霍乱诊断标准》WS-2008[2]、《食品卫生微生物学检验 沙门菌检验》GB/T4789.4―2008[3]。 2 检验步骤 2.1增菌培养 无菌操作下开启试管装半固体，挑取混匀后的半固体分别接种到下列增菌液，观察各增菌液生长情况。见表1。 取生长情况浑浊的SC、GN增菌液各1环，分别接种到麦康凯平板、SS平板上，取葡萄糖肉浸液肉汤、营养肉汤各1环分别接种血琼脂平板和普通平板，取碱性蛋白胨水划线接种TCBS平板、碱性琼脂平板，37℃ 24 h培养，观察各平板上的菌落特征。 2.2分离培养情况 SS平板和麦康凯平板上可见圆形、湿润、透明光滑中等大小菌落，在SS平板上呈中心褐色；普通平板上有两种菌落，一种为无色半透明圆形较小菌落，另一种为无色透明扁平光滑湿润较大菌落；血平板上也有两种菌落，一种为乳白色圆形不透明小菌落，无溶血环，一种为无色透明扁平较大菌落，有溶血环；TCBS平板上有黄色较小菌落；碱性琼脂平板上有扁平光滑湿润透明的较大菌落，无拉丝现象。 2.3 麦康凯及SS平板上挑取可疑菌落以及普通平板和血琼脂平板上较小菌落 分别从麦康凯及SS平板上挑取可疑菌落以及普通平板和血琼脂平板上较小菌落进行氧化酶试验和染色镜检。结果：氧化酶-，G-无芽胞短小杆菌。 2.3.1 接种双糖铁琼脂斜面，37℃ 24 h培养。结果均为：斜面-、底层产酸产气、硫化氢+、动力+。 2.3.2生化试验及血清学鉴定。 2.3.4挑取斜面上菌苔做下列生化试验[4-5]，37℃，24~48 h培养，生化结果见表2。 2.3.5血清学鉴定：沙门菌属A-F群多价O：++++；O4：++++；O12：++；O1：－；O5：－；Hb：++；H5：－；H2：－；Henx：－；Hw：－；盐水：－。 2.3.6同时用标准菌株50004乙型副伤寒沙门菌作对照，生化试验、血清学结果基本同上。 2.3.7结果报告：报检出乙型副伤寒沙门菌（抗原模式为4，12：b）。 2.4 TCBS上黄色菌落、碱性琼脂平板上菌落、血平板和普通平板上较大菌落 挑取TCBS上黄色菌落、碱性琼脂平板上菌落、血平板和普通平板上较大菌落做氧化酶试验和镜检。结果：氧化酶+，G-弯曲菌。 2.4.1挑取典型菌落作纯培养，再进行血清学凝集试验。霍乱弧菌O1群多价：－；霍乱弧菌O139：－；盐水对照：－。 2.4.2 生化试验。 2.4.3 挑取纯培养物做下列生化试验[4-5]，37℃，24~48 h培养，生化结果见表3