2草鱼锚头鳋卵囊孵化与幼体培养适宜条件的探讨.docVIP

几种环境因子对草鱼锚头鳋卵囊孵化和无节幼体培养的影响 摘要：本文报道了几种环境因子对草鱼锚头鳋卵囊孵化和无节幼体培养适宜的影响结果。通过观察虫体挂卵时间、培养水温、水质和pH值环境因子对锚头鳋卵囊孵化率、无节幼体培育成活率的影响，结果表明，锚头鳋排出卵囊后，卵囊继续在虫体上挂卵48 h的孵化率最高，而采用过滤池塘水，并调节pH值为7.5、在25℃水温条件下进行锚头鳋卵囊孵化和无节幼体的培养，可以获得最高的卵囊孵化率和无节幼体的培育成活率。 关键词：草鱼；草鱼锚头鳋；卵囊；无节幼体；培养条件 草鱼锚头鳋（Lernaea ctenopharyngodontis Yin）为锚头鳋的1个种，可以寄生在草鱼（Ctenopharyngodon idellus）体表的各个部位。在我国，鱼类的锚头鳋病主要流行于江苏、湖北、广东等地[1]。 关于鱼类的锚头鳋病，国内、外的学者已经进行过一些研究[2~16]，但是，各种环境因子对锚头鳋卵囊的孵化率和无节幼体培养成活率的影响，迄今为止尚未见有详细的研究报道。本研究将成熟草鱼锚头鳋的卵囊置于各种环境条件下孵化并对其无节幼体进行培育，探讨了有利于草鱼锚头鳋卵囊孵化及其无节幼体（Nauplius of Lernaea ctenopharyngodontis Yin，简称NLC）培育的适宜条件，旨在了解无节幼体生存、发育的适宜条件和正常死亡率，有利于快速大量获得适宜发育阶段的无节幼体，满足试验的需要，为最终科学地控制这种常见寄生虫病提供基础资料。 1 材料与方法 1.1 草鱼锚头鳋虫体与卵囊来源 草鱼锚头鳋采自武汉市洪山区青菱乡养鱼池中患锚头鳋病的草鱼，将携带草鱼锚头鳋的草鱼带水运回试验室。摘下携带绿色卵囊的草鱼锚头鳋后，首先用蒸馏水反复冲洗虫体，然后放入蒸馏水中自然孵化。从鱼体上取下草鱼锚头鳋时，为了保证虫体的完整，先用解剖针或细镊子将虫体附近鱼体组织挑破，仔细地将虫的头部挖出来，将取出的虫体放在盛有蒸馏水的培养皿中，剥离虫体附着的组织碎片、包在虫体前端的鱼体组织和虫体上的附着物如聚缩虫等，将其用蒸馏水反复冲洗掉。 1.2 试验环境设定与水质条件 锚头鳋卵囊孵化与无节幼体培养试验在武汉市水产科学研究所鱼病实验室进行。虫体和卵的观察采用体视显微镜（DX-Ⅲ，北京泰克），试验容器为结晶皿，水源为经曝气处理72 h的自来水，pH 7.2~7.4（酸度计测定）、溶氧6.8~8.5 mg/L（碘量法测定）、水温（25±1）℃（水银温度计测定）、氨氮浓度＜0.05mg/L（奈氏比色法测定）、硫化氢不得检出（比色法），控制光照周期为16 h光照；8 h黑暗。 1.3 卵囊孵化与无节幼体的培养 选取携带有绿色卵囊的草鱼锚头鳋“壮虫”，放入结晶皿中培养、孵化。每隔40 min观察1次，无节幼体一旦孵出，立刻用吸管吸出并计数，并移入培养试验用结晶皿中。在无节幼体孵出后6 h内仍未用于培养试验的无节幼体，弃去。 1.4 测定指标与统计分析 孵化率（Hatching rate，HR）＝（孵出的幼虫数/卵囊内全部卵粒数）×100% 成活率（Survival rate，SR）＝（成活数/试验虫体数）×100% 试验中发现的桡足幼体视同无节幼体进行计数。统计分析在STATISTICA version 8.02环境下进行，试验数据采用单因子方差分析（ANOVA）。 1.5 锚头鳋挂卵囊时间对孵化率的影响 自卵囊排出虫体后，间隔0 h、12 h、24 h、36 h和48 h后收集卵囊，在每个盛有水150.0 mL的结晶皿中放入同源的1对锚头鳋卵囊，设置4组平行。观察其是否随挂卵时间变化而出现不同的孵化率。 1.6 水温对锚头鳋卵囊孵化率的影响 本研究中设定试验水温为15℃、20℃、25℃和30℃等4个不同的温度组。从有锚头鳋感染的草鱼上摘下具绿色卵囊的锚头鳋卵囊，把同一个虫体的1对卵囊分开，将一个卵囊放入设定的水温条件下，而将另一个卵囊放入25℃水温条件下，每组设置7个平行。连续观察并记录锚头鳋幼虫出膜时间。 1.7 水温对锚头鳋无节幼体成活率的影响 在每个结晶皿中盛水150.0 mL后分别置于15℃、20℃、25℃和30℃条件下，将同期孵化出的锚头鳋无节幼体分别放入控制不同水温的结晶皿中，每个结晶皿中放入40个无节幼体，每组设置4个平行，连续观察并记录虫体死亡时间。 1.8 不同培养用水对锚头鳋无节幼体成活率的影响 在每个盛有150.0 mL 的0.3%盐水、过滤养鱼池塘水、蒸馏水或者经过曝气48 h的自来水的结晶皿中，分别放入40个由同一虫体上摘下的卵囊孵化出的无节幼体，置于25℃水温条件下培养，每个组设置4个平行。养鱼池塘水采自武汉市水产科学研究所养殖池塘中，水呈嫩绿色、每天早晚有颜色变化、无异味、测定pH 7.4~7.6、溶氧量