卵巢上皮性癌SKOV3细胞中休眠期细胞的干细胞属性的探究.pdfVIP

中文摘要 卵巢上皮性癌SKOV3细胞中休眠期细胞干细胞属性的研究 摘 要 目的：利用卵巢上皮性癌(简称卵巢癌)细胞株SKOV3建立异种移 植瘤模型，采用PKH26荧光标记技术结合流式细胞术从移植瘤细胞中分 选出处于休眠期的细胞，分析这些细胞的干细胞标记物的表达、体内成瘤 能力、体外克隆形成率以及细胞周期分布，探讨PKH高保留的卵巢癌休 眠细胞的干细胞属性，为临床卵巢癌的耐药及复发提供理论依据。 方法： SKOV3 只饲养3周、5只饲养6周后取注射部位的肿瘤组织，胶原酶消化成单细 取注射部位的肿瘤组织，胶原酶消化成单细胞悬液，此时细胞命名为 SKOV3-R。 具体的实验方法如下： 1 2用流式细胞术(flow 中，三群PKH26不同保留水平细胞群的分布。 SKOV3．R细胞中0ct．4和Nestin的mRNA表达水平。 细胞中CD44蛋白的表达量。 SKOV3．R细胞体外克隆形成能力。 裸鼠的大腿皮下， 观察各组细胞的体内成瘤能力。 7 体细胞周期的分析 中文摘要 13．0统计软件处理，所有实验重复三 8统计学方法：数据统计采用SPSS 次，计量资料以均数士标准差表示(冤士s)，方差齐性检验，三组以上比较采 用方差分析，组间差异采用LSD法，两组数据比较采用f检验，以a=0．05 统计学意义。 结果： l 以上。满足后续实验要求。 差异有统计学意义(尸O．01)。 3 Real．time Nestin表达水平显著高于PKH2610群(尸O．0 0．05)。 学意义(胗O．05)。 2 中文摘要 的克隆形成率比较，后者明显高于前者，差异具有统计学意义(尸O．05)。 R-PKH26m’lo细胞的成瘤率为100％、20％(1／5)。5000和 6嗍细胞接种裸鼠4周后，均未成瘤。 体细胞大部分处于G0／G1期，两组处于G0／G1期的异倍体细胞数相比， 细胞中PKHl0群细胞中处于S期的异倍体细胞数相比，差异有统计学意义 胞，差异有统计学意义(P--0．020．05)。 结论： 1 群细胞有更高的趋势，表明化疗前、后肿瘤中休眠状态的PKH高保留的 细胞具有干细胞属性，且化疗后残留的肿瘤干细胞属性更强。提示这种具 有干细胞属性的休眠细胞与肿瘤的耐药存在相关性。 2 提示静止的异倍体细胞与肿瘤的复发存在相关性。 关键词：卵巢上皮性癌；PKH26；肿瘤休眠；肿瘤干细胞；细胞周期 英文摘要 on The characteristicsofcancerstem study cellin epithelial ovariancancerdormantSKOV3 cell group ABSTRACT established tumormodelwith objective：Wexenotransplanted epithel ialovariancancerSKOV3cellsand sortedthedormantcellsfromthet tumorPKH26 and rans