实时定量RT-PCR检测多种肝细胞癌及胃癌细胞系MiR-17-92基因簇的表达.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要………………………………………………………………………l 英文论著摘要……………………………………………………………………”3 二、英文缩略语………………………………………………………………………·5 三、论文 前言…………………………………………………………………………………………………………．6日O舌…………………………………………………………………………………………………………· 实验材料与方法…………………………………………………………………·6 实验结果…………………………………………………………………………12 讨论………………………………………………………………………………………………………”l5 结论………………………………………………………………………………………………………“15 7 四、本研究创新性的自我评价…………………·o…………………………………l 五、参考文献…………………………………………………………………………18 六、附录 9 综j丕………………………………………………………………………………………………………“l 在学期间科研成绩………………………………………………………………27 致{射………………………………………………………………………………………………………一28 个人简介…………………………………………………………………………29 ·中文论著摘要· 实时定量RT-PCR检测多种肝细胞癌和胃癌细胞系 MiR-17．92基因簇的表达 目 的 上C130rf25基因第三内含子区。miR．17．92基因簇参与哺乳动物多个器官发育并 与多种实体瘤的发生密切相关。到目前为止，对miR-17．92的研究主要集中在肺 癌，尤其是小细胞肺癌和恶性淋巴瘤，对肝胃等消化道恶性肿瘤的研究很少。本 研究采用实时定量RT-PCR技术检测多种肝细胞癌和胃癌细胞系miR．17．92基因 簇的表达水平，并以正常肝细胞系(L．02)和正常胃粘膜细胞系(GES．1)作为对 照，初步探讨miR．17．92基因簇异常表达与肝细胞癌和胃癌发生的关系及其作用。 方 法 G2肝癌细胞系，【广02正常肝细胞系，AGS，MKN．1， 培养Bel7402，Hep MGC．803，BGC．823为低分化癌。待细胞进入对数生长期后，收集约lxl05细胞， RNA做阴性对照，HL．60白血病细胞系做阳性对照，运用TaqMan探针实时定量 PCR技术检测miR．17．92基因簇在上述各细胞系中的表达情况，应用2。丛Q法计算 miR．17．92基因相对表达量，明确各种肝细胞癌和胃癌细胞系与相应J下常细胞系相 比表达量差异。 结 果 G2 低分化肝癌细胞系Hep miR．17．92基因簇表达ct值平均值为22．62，高分 化肝癌细胞系Bel7402 G2表达量为Bel7402的3．86 ct值平均值为24．83，其中Hep 倍。而L．02正常肝细胞系不表达miR-17．92基因簇。与正常胃粘膜细胞系GES．1 相比，miR．17．92基因簇在七株胃癌细胞系中的表达均有不同程度的上调，其中低 分化株BGC．823表达量最高，为正常胃粘膜细胞系的6．23倍，低分化胃癌细胞系 (1．53+0．28)，(p=0．020．05)。 结论 l、miR-17．92基因簇在肝癌及胃癌细胞系中的表达均有不同程度的表达上调， 可能参与上述两种常见恶性肿瘤的发生发展过程。 2、miR．17．92基因簇