高效溶磷菌的筛选鉴定及其溶磷特性-江苏农业科学.PDFVIP

江苏农业科学　２０１７年第４５卷第８期 — ２５３— 邵　锴，邱业先，徐　婧．高效溶磷菌的筛选、鉴定及其溶磷特性［Ｊ］．江苏农业科学，２０１７，４５（８）：２５３－２５７． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１７．０８．０６８ 高效溶磷菌的筛选、鉴定及其溶磷特性 邵　锴，邱业先，徐　婧 （苏州科技学院，江苏苏州２１５０００） 　　摘要：为了从根际土壤中筛选出具有较高溶磷能力的菌株及优化溶磷条件，通过种子萌发初步研究溶磷促生效 应。通过稀释涂布法分离、筛选菌株，并进行ＡＴＢ细菌鉴定仪及 １６ＳｒＤＮＡ测序鉴定；采用单因子试验及正交试验优 化菌株溶磷发酵条件，利用种子发芽指标测定菌株的促生能力。结果显示，筛选出菌株 ＢＤ－１的溶磷能力最强，经 ＡＴＢ细菌鉴定仪及１６ＳｒＤＮＡ测序，该菌株被鉴定为路德维希肠杆菌。正交试验结果表明，在温度为３０℃、摇床转速 为１８０ｒ／ｍｉｎ、接种量为２ｍＬ、初始ｐＨ值为７．０的条件下培养７ｄ的溶磷效果最好，其溶磷量为１８１．７３ｇ／Ｌ。种子萌 发试验结果表明，该溶磷菌对作物种子萌发具有一定的促进作用。 　　关键词：溶磷菌；微生物肥料；条件优化；解磷能力；种子萌发；鉴定；筛选；溶磷特性 ＋ 　　中图分类号：Ｓ１５４．３８１　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１７）０８－０２５３－０４ 　　磷是植物生长必需的营养元素之一，植物的光合作用和 化，并通过种子萌发进行溶磷促生初步效果验证，为溶磷菌菌 体内的生化过程都必需有磷参与［１－２］，但其在土壤中主要以 剂开发微生物肥料打下基础。 ［３］ 难溶性矿物态存在 ，难溶性矿物态磷无法被作物直接吸收 ２ １　材料与方法 利用。为提高作物产量，超过９０ｋｇ／ｈｍ 磷肥被施用于土壤 ［４］ 中 ，部分磷肥被作物吸收利用，大部分被转化成难溶性磷 １．１　材料 返施于土壤。大量化学磷肥的施用，伴随土壤板结、土壤酸 １．１．１　土壤来源　于２０１５年４月 １５日采集江苏省扬州市 化、土壤贫瘠化日益严重。因此，提高土壤中磷的利用效率对 江都区双沟陈甸果园里长势良好的扁豆、韭菜、红薯、毛豆等 降低化学磷肥的施用量具有十分重要的意义。土壤中存在大 作物的根际土壤。土样采集后放置于无菌袋中，于实验室 量的微生物，能够将植物难以吸收利用的磷转化为可吸收利 ４℃ 冰箱内保存。 ［５］ 用形态，具有这种能力的微生物称为解磷菌或溶磷菌 。溶 １．１．２　培养基　有机磷筛选培养基：葡萄糖１０ｇ、ＣａＣＯ５ｇ、 ３ 磷微生物作为微生物肥料的开发和利用已经成为人们关注的 （ＮＨ）ＳＯ０．５ｇ、ＭｇＳＯ０．３ｇ、ＦｅＳＯ０．３ｇ、ＫＣｌ０．３ｇ、ＮａＣｌ ４ ２ ４ ４ ４ 焦点。土壤中存在的溶磷微生物能够通过自身生长代谢，转 ０．３ｇ、卵磷脂０．２ｇ、ＭｎＳＯ ０．０３ｇ，无菌水 １０００ｍＬ，ｐＨ值 ４ 化难溶性磷为可溶性磷，促使作物吸收利用。但是，微生物仅 ７．０～７．２；ＬＢ培养基：胰蛋白胨 １０ｇ、酵母粉５ｇ、ＮａＣｌ１０ｇ， 能够溶解难溶性磷，还不能被认为就是溶磷菌，溶磷菌还须考