草菇钙调磷酸酶催化亚基（Vv-CNA）的序列与表达.pdfVIP

南方农业学报 JournalofSouthernAgriculture ISSN 2095一】191；CODEN NNXAAB DOI：10．3969~：issn．2095-1191．2017．03．001 草菇钙调磷酸酶催化亚基( —CNA) 的序列与表达 汪健芳，徐志周，严俊杰，李 肖，张 磊，黄李琳，谢宝贵 (福建农林大学 菌物研究中心，福州 350000) 摘要：【目的】分析草菇钙调磷酸酶催化亚基(Vv-CNA)的序列与表达，为进一步探究草菇生长发育及子实体开伞 分子调控机理提供参考。【方法】通过生物信息学分析确定Vv-CNA基因的组成及保守结构，将ORFFinder预测的草菇 CNA氨基酸序列与从NCBI下载的其他真菌CNA氨基酸序列进行比对，并通过荧光定量PCR检测Vv-CNA基因在草菇 不同生长时期的相对表达量。【结果 】Vv-CNA基因编码区为2503bp，包含10个内含子(其中I2、I8、I9和I10存在内含子 保留现象)，编码610个氨基酸，GenBank~录号KX463514。将Vv—CNA氨基酸序列与动物 (人、小鼠)、植物(拟南芥、水 稻)和真菌(曲霉、酵母等)的CNA氨基酸序列进行同源比对分析，结果发现Vv—CNA蛋白有3个最保守的结构域，与密 褐褶菌(G1oeophyllum gabeum)的亲缘关系最近。Vv-CNA~因在草菇子实体的蛋形期和伸长期高表达，以蛋形期的 相对表达量最高。 【结论】Vv-CNA基因编码钙调磷酸酶催化亚基 ，其高表达有利于草菇菌柄的伸长。 关键词：草菇；钙调磷酸酶催化亚基(CNA)；基因结构；表达分析；菌柄伸长 中图分类号：$646．13 文献标志码：A 文章编号：2095—1191(2017)03—0381—05 ~一equenceand1eX13ressl●0n otncal’ci■neurl●n cata·llyt·ic‘SU1DUnl●t●l●n V_oJvariellavolvacea( CNA) WANGJian-fang，XUZhi-zhou，YANJun-jie，LIXiao，ZHANGLei， HUANGLi—lin，XIEBao-gui (MycologicalResearchCenter，FujianAgriculturalandForestryUniversity，Fuzhou350000，China) Abstract：【Objective】ThisresearchexploredsequenceandexpressionofcalcineurincatalyticsubunitinVolvariella volvaeea(Vv—CNA)，inordertoprovidereferenceforgrowthanddevelopmentof volvaceaandrevealtheregulatory me— chanismoffruitbodies．【Method】ThesequenceandconservedstructureofVv-CNAwereanalysedbybioinofrmatics．An— ticipated VolvaceaCNA aminoacidsequencebyORF-finderwascomparedwithCNAaminoacidsequencesofotherfu- gusdownloadedfrom NCBI．FluorescentquantitativePCR wasusedtodetectrelativeexpressionofvv—CNA atdifferent growthstagesof volvaeea．R【esuhlThecodingregionofVv—CNAwas2503bp，including10introns(intronretention wasdete