硼替佐米抑制RT细胞淋巴瘤细胞增殖和增强5杂氮胞苷去甲基化作用的研究.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………”4 研究论文硼替佐米抑制T细胞淋巴瘤细胞增殖及增强5杂氮胞苷去甲基 化作用的研究 前言…………………………………………………………………………………………8刖舌…………………………………………………………………………………………8 材料与方法…………………………………………………………………9 结果………………………………………………………………………………………．．14 附图…………………………………………………………………………一17 附表………………………………………………………………………………………．．22 讨论………………………………………………………………………………………．．26 结论………………………………………………………………………………………．．30 参考文献………………………………………………………………31 综述硼替佐米治疗非霍奇金淋巴瘤的研究进展………………………35 致谢………………………………………………………………………………………………．43 个人简历……………………………………………………………………44 中文摘要 硼替佐米抑制T细胞淋巴瘤细胞增殖及其增强5杂氮胞苷去甲基 化作用的研究 摘 要 目的：T细胞淋巴瘤(T．cell 恶性克隆增殖性疾病，是我国高发的非霍奇金淋巴瘤类型，约占所有非霍 奇金淋巴瘤的25％左右。目前，国内外尚缺乏理想的治疗方案，晚期T 细胞淋巴瘤常规化疗效果差，因而急需寻找有效的抗癌药物及其联合治 疗方案以提高T细胞淋巴瘤的疗效并改善患者预后。 硼替佐米是一种蛋白酶体抑制剂，通过影响多种细胞周期调控蛋白及 NFl(B活性，发挥抗肿瘤作用。淋巴瘤细胞中也普遍存在NFK：B的组成高 表达，FDA已经正式批准硼替佐米用于治疗多发性骨髓瘤。基础研究表 明硼替佐米对淋巴瘤亦具有抗肿瘤作用，在惰性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤的 治疗上获得了满意的效果，而T细胞淋巴瘤的相关研究，包括基础和临床 报告较少。目前，硼替佐米对淋巴瘤的作用机制尚未完全明确。 本课题前期研究己证实淋巴瘤患者及其细胞系中存在酪氨酸磷酸酶一1 (SH2．containingtyrosine 胞系T2细胞及原代B细胞淋巴瘤细胞中SHP．1基因重新表达或表达升 高，从而抑制肿瘤细胞增殖。 目前有关硼替佐米对Jurkat细胞增殖的研究报道尚少。为进一步明确 硼替佐米抑制淋巴瘤细胞增殖及促凋亡的确切机制，本实验拟采用硼替佐 米作用于人类T细胞淋巴瘤Jurkat细胞，观察硼替佐米对T细胞淋巴瘤 细胞增殖抑制、诱导凋亡作用，阐述硼替佐米对5杂氮胞苷去除Jurkat 细胞甲基化作用的影响及可能机制。 为T细胞淋巴瘤的治疗提供理论依 据。 方法： 1MTT法检测不同浓度的硼替佐米和5杂氮胞苷单药及二者联合应用 对Jurkat淋巴瘤细胞增殖的影响； 2 中文摘要 杂氮胞苷单药及二者联合应用对Jurkat淋巴瘤细胞凋亡的影响； 3RT．PCR检测各组Jurkat细胞DNMTs和SHP．1mRNA表达变化； 4统计学处理。 结果： l硼替佐米对Jurkat细胞增殖和凋亡的影响不同浓度的硼替佐米作 h、48h、72 用于Jurkat细胞24 h后，发现硼替佐米抑fl；IJJurkat细胞增殖， nmol／L、39．72nmol／L矛Fl 增殖抑制50％的药物浓度(IC50)分别是140．62 28．96nmol／L(table．8)。 nmol／L处理48 2硼替佐米30 h，形态学观察发现Jurkat细胞出现典型 的凋亡，表现为胞膜完整，核固缩或核碎裂，可