22q11微缺失在先天性心脏病中的检测和相关性研究.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 微缺失检测，探讨22q11微缺失与先天性心脏病的发病及表型之问的关系；比较 FISH法和多重PCR技术的优缺点。 方法： 选取200例散发先天性心脏病患儿作为实验组和120例健康儿童作为对照 组，留取全血，分别进行以下实验： 1．标本进行预处理，制成浓度合适的细胞悬液，分装于2个EP管中并分别 标记A组、B组： 2．A组标本：采用TUPLEl／ARSA 微缺失情况； deletion 3．B组标本：选择覆盖经典缺失区域(typical 41、22D4 4 个短串联重复序列多态位点(STR)：22D 2、22D3、D22S873， 采用盲法，应用多重PCR技术对标本进行扩增，通过毛细管电泳观察峰值，检 测22q11微缺失情况。 结果： 例，检出率为3．5％。其中，在85例室间隔缺损患儿中检测到22q11微缺失3例， 缺失率为3．5％；32例法洛氏四联症患儿中检测到22q11微缺失2例，缺失率为 6．3％；26例室间隔缺损合并房间隔缺损患儿中检测到22q11微缺失2例，缺失 率为7．6％。而其余先天性心脏病患儿及正常对照组儿童均未检测出22qll微缺 失。 分析22q11微缺失结果为阳性，而该例患儿FISH检测结果为阴性。 摘要 3．以FISH法为金标准，对多重PCR方法进行如下评价：灵敏度为100％；特 异度为99．48％；假阳性率约为0．52％；Kappa为0．929。 4．22q11微缺失与先天性心脏病关系：在实验组中，22q11微缺失率为3．5％ P=0．048(≤0．05)，差异有统计学意义。 l微缺失与先天性心脏病表型的关系：(1)根据已检测出22qll微缺 5．22ql 失阳性结果将实验组分为法洛氏四联症组、室间隔缺损组、室间隔缺损合并房 间隔缺损组，并进行统计学分析。经Fisher精确概率法检验，P值为O．636(p O．05)，无显著性差异：(2)将实验组中复合畸形患儿分为法洛氏四联症组(包 括法洛氏四联症伴多发畸形)及其他复合畸形两组，并进行统计学分析。经Fisher 圆锥动脉干畸形组、非圆锥动脉干畸形组进行比较，经Fisher精确概率法检验， P值为0．311(pO．05)，差异无统计学意义。 结论： l微缺失与先天性心脏病发病相关。 1．22ql 1微缺失与非综合征型先天性心脏病表型可能无关。 2．22ql 3．基于STR的多重PCR检测方法可用于先天性心脏病患儿22qll微缺失 的筛查。 l微缺失；先天性心脏病；多重PCR；FISH；STR 关键词：22ql Abstract ABSTRACT objective： This fluorescenceinsitu experiment adopted multiple PCR methodstodeterminethe of Chromosome11 microdeletionand relationship 22q Heart diseaseand the and of Congential compare these