羟基喜树碱对人增生性瘢痕成纤维细胞P-Smad3表达影响及兔耳增生性瘢痕作用的实验研究.pdfVIP

I lIIIIIII }Y1 摘要 摘 要 病理性瘢痕的防治是烧伤整形科的一个难题。目前治疗病理性瘢痕的方法 有很多，主要有手术、药物、放射、冷冻、压力等，这些治疗方法虽然取得了 一定的试验或临床治疗效果，但远期疗效、满意度远远没有达到患者要求的程 度，甚至一些治疗方法可以产生严重的并发症，这也给病理性瘢痕的治疗带来 了更大的阻力，因此研究一种安全有效、方便可靠的治疗方法仍是广大医务工 作者的艰难任务。至今，病理性瘢痕的治疗仍未取得突破性的进展，和病理性 瘢痕发生、发展、转归的机制研究发展较慢密切相关【l】。病理性瘢痕是人体对创 伤产生过度愈合反应的结果，主要包括增生性瘢痕(hypertrophicSCaT，HS)和瘢痕 (Extracellularmatrix，ECM)的过度沉积为特型2】【3】。目前对病理性瘢痕的研究 主要从成纤维细胞、组织胶原、细胞生长因子、基因研究、动物瘢痕模型等方 面进行，以期待了解病理性瘢痕的形成机制，从而为临床防治病理性瘢痕提供科 学的理论依据。 ． 维细胞进行培养干预，检测成纤维细胞P．Smad3mRNA及蛋白，以期了解 用。同时，应用羟基喜树碱局部注射兔耳增生性瘢痕模型，证实其对增生性瘢 痕的治疗作用，进一步了解其防治机制，为临床研究提供可靠的理论依据。 方法：1、人增生性瘢痕标本取自本院整形科患者，采用改进组织块培养法体外 培养成纤维细胞后，分为：空白对照组及实验组。空白对照组，细胞仅加入成 纤维细胞培养基；实验组：细胞加入成纤维细胞培养基和不同浓度羟基喜树碱， 腹侧面制作增生性瘢痕动物模型。待瘢痕形成后随机分为4组。分别于瘢痕基 底部及瘢痕内注射羟基喜树碱或生理盐水，注射总用量为601d。A组：生理盐水， mg／rra，D组：5mg／ml。每组用药：一次／3天。继续 B组：1．25mg／ml，C组：2．5 Ⅱ 摘要 喂养4周。分别于注药后2、4周切取瘢痕组织做HE染色，免疫组化测Bcl．2、 cellnuclear 增殖细胞核抗原(proliferating Cx43蛋白的表达。 500 ns／ml组(235．75+20．82)，125ng／rIll组 ng／ml组(157．66士14．39)，250 P．Smad3蛋白表达水平光密度比值两两比较也有差异(PO．05)。实验结果表明， 1．25mg／ml组(B组)瘢痕颜色变浅，体积减小，质地变软，胶原少而齐整，与 注药时间正相关；C组、D组与A组、B组两两间比较瘢痕增生指数、成纤维 细胞数差异有统计学意义(P0．01)；1．25mg／ml组与对照组比较无明显差异 异有统计学意义(PO．01)；B组与对照组对比无明显差异(P0．01)。 结论：1、羟基喜树碱对人增生性瘢痕成纤维细胞P．Smad3mRNA及蛋白表达有 明显的抑制作用，对防治增生性瘢痕有一定意义。2、羟基喜树碱能够抑制兔耳 瘢痕的增生，机理可能是减少PCNA、Bcl一2和增加Cx43的表达，从而减少成 纤维细胞增殖，促进其凋亡，增加细胞间缝隙连接通讯，这又为临床应用羟基 喜树碱治疗增生性瘢痕提供了科学依据。 关键词：羟基喜树碱；增生性瘢痕；成纤维细胞；P．Smad3；兔耳 III Abstract ABSTRACT onP—Smad3 of scar Theeffectof