脑梗死早期应用黄连素对缺血性脑组织的保护作用及对pAkt、pGSK、pCREB及NF-κB调节作用的实验研究.pdfVIP

中文摘要 脑梗死早期应用黄连素对缺血性脑组织的保护作用及对pAkt， pGSK．pCREB和NF．KB调节作用的实验研究 摘 要 ‘目的：脑血管病已成为我国居民死亡和成人残疾的首位原因，其中以 缺血性脑血管病最为常见。缺血性脑血管病最初几天的继发性脑损伤常导 致病情加重，损伤机制主要包括细胞炎症反应、线粒体功能异常、细胞毒 性作用、氧化应激、细胞凋亡、Ca2+稳态失调等，这是一个复杂的病理级 联反应，其中以过度的炎症反应和细胞凋亡为主要原因，加速脑梗死缺血 半暗带的细胞死亡。因此，如何减轻炎症反应和细胞凋亡成为治疗急性脑 梗死的重要方法。Akt是一种丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，是磷脂酰肌醇。3 经细胞的存活相关最重要信号通路。Akt激活后可通过磷酸化作用灭活凋 亡效应分子如糖原合成酶激酶3(GSK3)、又头转录因子、半胱氨酸天 冬氨酸蛋白酶9和BAD等从而促进细胞存活，具有抗脑缺血损伤作用， 可提高脑组织抗缺血损伤的能力。P13．K／Akt通路激活后能够作用于下游 活靶基因表达增加。最近研究证明激活P13．K／Akt通路还能直接抑制炎症 反应。从而可以在促进存活和抑制炎症反应两方面降低急性脑缺血的继发 性脑损伤。众多中药成分可以通过调节Akt活性起到脑保护的作用。黄连 腹泻的中草药有效成分，近代研究显示黄连素具有广泛的生理作用，除了 对心肌、脑血管和肝脏具有抗炎、抗氧化、降低血糖、调节代谢等作用以 外，还具有抗肿瘤作用。黄连素是否可以起到脑保护作用，其作用机制如 何均有待探索。 本实验成功建立大鼠大脑中动脉闭塞模型，并运用此模型进行：①应 用黄连素后，观察其对脑含水量、神经功能缺损评分、脑梗死体积的影响， 探索其脑保护作用；②应用黄连素后，测定缺血组织的phospho．Akt、 phospho．GSK3 讨其与脑保护作用之间的关系，及黄连素脑保护作用的可能机制，为临床 中文摘要 治疗提供更为有利的理论依据。 方法：实验分为两部分：实验一，黄连素的脑保护作用研究。实验二， 化。 组(Sham)、单梗组(pMCAO)、黄连素小剂量(10 连素大剂量(40 cerebralwas 侧大脑中动脉闭塞模型(middle artery 中动脉阻塞术后立刻腹腔注射黄连素溶液(10 mg／kg或40mg／kg)，并 于术后24小时进行神经功能评分，完毕后将动物断头处死，留取病变侧 脑组织进行干湿重法脑含水量测定，采用2％2，3，5．三苯基四唑氮红 chloride，TTC)染色测定脑梗死体积。 (triphenyltetrazolium 0 组(Sham)、单梗组(pMCAO)、黄连素小剂量(1mg／kg)组(BBR—L)及黄 连素大剂量(40 (Western 定phospho-Akt、phospho·GSK3 表达情况。 结果： h采用改良的6分法进行 1．享申经功能评分：实验一中，MCAO后24 症状缺损均有明显改善(均为尸D．05)。 2．脑组织含水量测定：Sham组为78．59 -4-1．69％，与其相比，黄连素治疗组脑组织含水量降低并具有统计学差异 4-1．69％VS．82．44 VS．BBR—H， VS．BBR—L，84．35 (pMCAO 4-1．83％；pMCAO 84．354-1．69％VS．81．84 4-1．91％)(尸0．05)。 3．梗死体积(％甩V)的测定：与单梗组(％眦V：44．174-7．44％)相比， 4-2．63；BBRoH 黄连素