脓毒性休克早期液体复苏的实验探究.pdfVIP

摘 要 目的: 本课题通过建立并应用兔脓毒性休克模型 研究不同液体对兔脓毒性休克早 期复苏有创动脉血压及组织灌注的影响 对血清组织因子 Tissue Factor, TF 细胞间粘附分子-1 Intercellular Adhesion Molecule-1, ICAM-1 诱导型一氧化氮 合成酶 inducible Nitric Oxide Synthase, iNOS 浓度的影响 对各脏器组织形态 学及肺组织毛细血管内皮细胞核因子-κB Nuclear Factor kappa-B, NF-κB 表达的 影响 观察各复苏液体对机体的副反应 为脓毒性休克早期复苏液体的合理应用 提供实验依据 方法 1. 成年健康雄性新西兰大白兔20 只 随机平均分为假手术组及模型组 采用兔 改良盲肠结扎穿刺 CLP 腹膜炎模型 比较肛温 平均动脉压 MAP 动 脉血气指标 PH 值 动脉血二氧化碳分压PaCO2 碱剩余BE 碳酸氢根离 子浓度 HCO3 动脉血氧饱和度 SaO2 动脉血乳酸值 LA 行颈外静脉 血培养及腹水培养 计算成模时间 光镜 透射电镜下观察脓毒性休克早期 各脏器形态学改变 免疫组织化学法 IHC 观察兔肺组织毛细血管内皮细 胞NF-κB 表达并测量其灰度值 酶联免疫吸附法 ELISA 测定并比较两组 兔血清TF ICAM-1 iNOS 浓度 2. 成年健康雄性新西兰大白兔40 只 随机平均分为生理盐水复苏组 NS 组 4.2%高渗盐复苏组 4.2%HS 组 7.5%高渗盐复苏组 7.5%HS 组 羟乙基 淀粉 130/0.4 复苏组 HES 组 羟乙基淀粉 130/0.4 与高渗盐 4.2%HS 1:1 混合液复苏组 HHS 组 根据初级复苏方案及补充复苏方案分别对成模 动物用不同液体进行复苏 记录各复苏组复苏0 小时 2 小时 4 小时收缩压 SBP 舒张压 DBP 平均动脉压 MAP 血气 PH 值 BE 值 动 脉血乳酸值 LA 血清钠离子浓度 [Na ] 比较上述指标在不同复苏方 法不同复苏时相变化的趋势 比较不同复苏方法间的差异 分别比较各组各 时相 复苏2 4 小时 上述指标与基线水平 复苏0 小时 的差异 分别比 较同一时相 复苏0 2 4 小时 各组上述指标的差异 计算维持6 小时复 苏所需复苏液体量 观察复苏过程各组动物耐受性 复苏6 小时处死动物 称取右肺中叶3g 肺组织计算并比较各组肺组织含水量 3. 成年健康雄性新西兰大白兔40 只 随机分组 模型制作及复苏方案同上 复 苏第6 小时处死动物 处死前取颈外静脉血5ml 3500 转/分 离心3 分钟后 取血清 ELISA 法测定并比较各组血清TF ICAM-1 iNOS 浓度 动物处死 i 后取心脏 肺组织 肝脏 脾脏 肠道 肾脏做HE 染色 光镜下观察并比 较各组器官病理形态学变化 IHC 法观察并比较肺组织毛细血管内皮细胞 NF-κB 表达 灰度法测定并比较各组灰度值 结果 1. 制模成功时间为 18.91±1.38 小时 模型平均动脉压MAP 95.00±10.82 vs. 52.38±15.57 P 0.05 血气 PH 7.40±0.05 vs. 7.09±0.15 P 0.01 PCO2 30.0±5.83 vs. 19.80±4.10 P