体外培养皮肤种子细胞复合高分子支架原位修复深度烧伤创面的探究.pdfVIP

体外培养皮肤种子细胞复合高分子支架原位修复深度烧伤创面的研究 中文摘要 体外培养皮肤种子细胞复合高分子支架原位修复深度烧 伤创面的研究 中文摘要 组织工程的原理是利用生物学和工程学的方法，再生缺损的组织或者器官。烧伤 临床救治的关键是创面的修复和皮肤再生，如何及时、有效地封闭烧伤创面并完整的 再生创面皮肤是烧伤治疗的根本任务。自体皮肤移植是治疗深度烧伤创面的金标准， 但大面积、特大面积烧伤后，自体皮源严重不足常危及病人的生命，所以组织工程皮 表皮细胞体外培养方法。随后，表皮细胞膜片培养与移植技术为大面积深度烧伤病人 提供了充足的皮源，提供了烧伤创面修复的新方法，为皮肤组织工程奠定了基础。 体外培养表皮细胞膜片的成功研究和开发提示研究者，以自体细胞作为组织工程 皮肤的种子细胞理论上能够无限量再生自体皮肤，而且还可以避免免疫排斥作用；临 床治疗过程中，为大面积烧伤患者节省了皮源，提高了存活率。另一方面，随着生物 材料学的不断发展，将具有特定功能或分化潜能的种子细胞与可降解生物材料(支架 材料)共植入体内，随着种子细胞的不断扩增、细胞外基质的分泌和生物材料的逐渐 降解、吸收，最终形成具有正常皮肤结构或接近正常皮肤结构人工皮肤。种子细胞和 支架材料成为组织工程研究的主要内容。在组织工程的研究与应用中，种子细胞的来 源、分离纯化、规模化扩增等是制约其发展的重要瓶颈问题之一；支架材料应当具有 适宜的降解速率，使支架材料在一定时间内吸收；以及良好的组织相容性，形成具有 功能活性的皮肤组织。故理想的支架材料是组织工程皮肤的另一个关键。丝素蛋白作 为应用生物医用高分子，．具有优良的生物相容性、缓慢生物降解性能、独特的力学性 能和低致敏性，而且来源于天然蚕丝，易获取且价格低廉；丝素蛋白作为生物材料得 到了广泛的研究和应用，如将丝素蛋白膜作为伤口敷料，比合成高分子膜具有更好的 透气性；众多研究表明丝素蛋白是一种较理想的构建组织工程皮肤的生物材料。 本研究利用三种不同性质的细胞(效能细胞，单能干细胞，多能干细胞)作为组 织工程皮肤的种子细胞，联合高分子支架材料丝素蛋白膜构建组织工程皮肤，来修复 I 中文摘要 胎盘间充质干细胞与丝素蛋白／羟基磷灰石材料在骨创伤修复中的实验研究 皮肤缺损创面-摸拟的深度烧伤切痂创面。本研究的目的在于探索以组织工程皮肤 修复深度烧伤创面的新方法，以期解决大面积深度烧伤创面临床救治的棘手问题。研 究思路为体外分离培养纯化种子细胞，并进行相应的细胞表型鉴定，联合高分子支架 移植于创面共培养，在深度创面原位再生皮肤表真皮结构，而修复创面。本研究以组 织工程种子细胞联合高分子支架材料，原位修复了深度创面并再生皮肤，为组织工程 皮肤用于大面积深度烧伤临床救治提供参考及方法。 第一部分 目的：探索以体外培养自异表皮细胞混合悬液原位移植，修复深度烧伤创面的新 方法，并对其过程和机制进行探讨。 方法：体外分离和培养自、异体表皮细胞，将两种细胞的混合悬液移植到异体皮 覆盖下的深度烧伤创面，观察表皮细胞的增殖和转移过程、创面上皮化过程、异体皮 验动物，通过切割法在大鼠背部制作Ⅲ。皮肤缺损创面。考察体外培养自、异体表 皮细胞移植在创面再生表皮的作用，并以体外培养自体表皮细胞膜片作为对照。在此 基础上，选择临床Ⅲ。烧伤创面病例，研究体外培养人体自、异体表皮细胞对m。 ’： 创面的修复和上皮化作用。 结果：动物实验：体内原位培养r3周后见皮肤缺损创面被表皮细胞覆盖，表面 光滑，与皮下连接紧密，无松动，切片见3。4层细胞，且有许多皮钉样结构深入皮下、 肌肉。临床应用：混合表皮细胞悬液移植后3。4周，渐融合成片，外盖的异体皮肤脱 落，伤口渐愈合。3、6个月随访表明愈合后的创面平整、轻度瘢痕、无排异反应。 结论：动物实验表明自、异体表皮细胞混合悬液能够在烧伤创面原位完整地再生 表皮，封闭烧伤创面。临床应用也表明，自、异体表皮细胞能够Ⅲ。创面增殖和转 移，形