体外冲击波对早期股骨头坏死区骨髓间充质干细胞破骨分化的影响和相关临床研究.pdfVIP

中文摘要 体外冲击波对早期股骨头坏死区骨髓间充质干细胞 破骨分化的影响及相关I临床研究 摘 要 ofthefemoral 股骨头坏死(osteonecrosis 着较高发病率且呈进行性发展的疾病，并以因局部供血不足而引起的骨细 胞的坏死为特征。股骨头的骨组织中含有各种活性细胞，包括成骨细胞、 骨活性减弱，而0C的骨吸收活性增强，从而形成恶性循环，导致坏死区 进一步扩大。 stem 骨髓间充质干细胞(mesenchymalcell，MSC)是具有多向分化潜 能的干细胞，能够在一定的微环境中向成骨细胞和破骨细胞分化，但向何 B受体活化因 种细胞分化取决于其所处的特定微环境，MSC在核因子K activatorofnuclearfactor 子配基(Receptor kappa．B 诱导下会向OC分化，从而使骨吸收增强，股骨头坏死区存在RANKL等 细胞因子，移植入坏死区的MSC一部分将会向破骨细胞分化。 Shock Wave，ESW)是由电子水压装置、 体外冲击波(Extracorporeal 电磁装置等产生的一种机械波，它可在固体和液体物质以及人体组织中 发挥作用，能促进骨折断端、骨缺损区和骨坏死区骨细胞的增生，促进 MSC向成骨细胞分化，具有确切的促进成骨细胞分化的作用。但ESW对股 骨头坏死是促进或是抑制临床中尚无相关研究。 对坏死区MSC向破骨分化的影响，并结合临床实验，为体外冲击波联合 骨髓间充质干细胞移植治疗早期股骨头坏死提供更有力的证据。 第一部分体外冲击波对早期股骨头坏死区骨髓间充质干细胞破骨分化 的影响 目的： 中文摘要 死区MSC向破骨分化过程中细胞形态及数量的变化、RT-PCR观察破骨 electron 分化过程中特异基因表达的差异、扫描电子显微镜(scanning Osteo骨细胞培养表面定量分析骨吸收能 microscope，SEM)以及Coming 力，探讨ESW对股骨头坏死区MSC向OC分化的影响 方法： 1 MSC的获取及分组：在武警总医院行MSC移植治疗股骨头坏死 的患者中，选取10名年龄18．30岁患者，在获得患者知情同意的情况下， 行股骨头钻孔时，收集股骨头坏死区血约15mL，实验室分离提纯MSC， 导为实验组，无ESW干预为对照组。 2 在光镜下观察细胞形态及数目变化，HE染色，TRAP染色、鬼笔环肽荧 光染色后，通过对多核细胞计数以及多核化率的计算，分析ESW对MSC Osteo骨 扫描骨吸收陷窝，并对陷窝面积及相对深度进行分析；Coming 细胞培养表面定量分析其骨吸收能力。ESW干预为实验组，无ESW干预 的为对照组，对实验结果进行f检验进行统计学分析，设定p0．05为差 异有统计学意义。 结果： l M．CSF诱导下，从第7天 MSC在50ng／mlRANKL以及25ng／ml 染色对3核以上的OC进行计数，并计算多核化率，进行统计学分析发现， 实验组多核OC数以及多核化率与对照组相比差异均有统计学意义，ESW TRAP和Cat K水平的变化，ESW组较对照组表达水平降低。 J软件分析骨吸收陷窝的面积和相对深度，实验组