体外雪旺细胞及血管内皮细胞共培养的实验研究.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………………4 研究论文体外雪旺细胞与血管内皮细胞共培养的实验研究 前言………………………………………………………………………………………………．9 日lJ舌………………………………………………………………………………………………………………………………。y 材料与方法…………………………………………………．．．………………1O 结果……………………………………………………………………………………………”14 附图…………………………………………………………………………一16 1 附表…………………………………………………-…………………………2 讨论………………………………………………………………………………………22 结论…………………………………………………………………………一27 参考文献……………………………………………………………………·28 1 综述 组织工程人工神经血管化的最新研究讨论…………………………3 致谢………………………………………………………………………………”39 个人简历…………………………-……………………………………………．40 中文摘要 体外雪旺细胞与血管内皮细胞共培养的实验研究 摘 要 目的：周围神经损伤后，缺损的替代修复是一直临床关注的热点，尚 未得到完全解决。长期以来，自体神经移植被公认为修复缺损周围神经的 “金标准”。但由于可供移植的自体神经有限，同时供区常常伴有不同程 度的副损伤，而且容易造成供区感觉或运动功能障碍、创伤性神经瘤形成、 手术难度大以及轴突生长错位等问题，因此，寻找一种理想的自体神经的 替代材料修复缺损的周围神经成为近年来周围神经研究领域的焦点。然 而，到目前为止，组织工程神经移植的效果还不是很理想，与自体神经移 植的效果相比还有差距，如缺损的神经过长或较粗大，或为肌腱、骨外露 等血供不良的创面时，修复效果不好。是因为组织工程神经移植区的再血 管化延迟，在早期不能及时建立内在有效的血液循环，导致缺血缺氧，部 分种子细胞死亡，神经再生的质量降低。因此，找到解决人工神经移植区 血管化的有效方法是决定人工神经移植成功的关键因素之一。 周围神经系统的髓鞘形成细胞，具有支持、保护、分隔、营养、趋化和促 进再生的神经纤维成熟等主要功能，同时能够产生一些神经营养因子，通 过多种途径作用于受损的周围神经，进而促进损伤神经功能的恢复，在周 围神经损伤后的修复性再生过程中起着非常关键的作用。因而提高损伤局 部雪旺细胞的增殖能力及数量能够更好地促进受损周围神经的功能恢复。 endotllelia 血管内皮细胞(Vascular 层扁平细胞，不仅是位于血液和血管壁之间的一个选择性通透屏障，而且 是毛细血管重要组成部分。正常神经组织内血管较丰富，神经内膜内分布 有毛细血管网，是神经组织与营养物质的桥梁，并保证神经纤维的生成和 正常功能的发挥。 本实验目的是以雪旺细胞和血管内皮细胞联合培养为组织工程人工 神经血管的形成提供接近天然的条件，并进一步证明两种细胞联合培养能 够在血管形成的基础上为雪旺细胞提供营养并促进其生长，同时找到两种 细胞共培养的最适比例，进而尝试找到一种理想的促进组织工程人工神经 经移植的临床应用提供前期基 怀孕28天的新西兰白兔，耳缘 静脉注入空气处死，常规消毒、铺无菌巾，迅速剖腹取胎兔，在无菌条件 下取其坐骨神经，并去除神经外膜及束膜，Hank’s液冲洗5遍，剪碎，使 用双酶消化法获取SC