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病料采集和保存制度
病料采集和保存制度
采集病料是微生物学诊断、血清学诊断和病理组织学诊断等实验室诊断方法的重要环节,直接影响着检验结果的准确性和速度。为了提高诊断的时效性和准确性,以便及时制定和落实防制措施,减少经济损失,采集前应准备好经消毒的器械和容器。供实验室检验用的病料采集时要尽可能齐全,内脏、淋巴结和局部病变组织。病料采集的全过程都要注意无菌操作,器械都要经过消毒,做到一畜一套器械。一般情况下,采集病料的病例应选取临床表现较明显且典型的病例采集病料最好选择濒死期或刚死的畜禽。病料的采取,须于动物死后6小时以内进行。死因不明的动物尸体,在解剖前,必须做血液涂片,染色镜检,排除炭疽后方能解剖取样。盛装病料的容器在装病料后应加盖并用胶布或蜡密封,在容器外壁贴上标签,注明病料的名称、采取日期。天气炎热或不能马上送检的用作细菌检验的材料,可用30%甘油缓冲盐水保存;作病毒检验的材料,可用50%甘油缓冲盐水保存,并做到低温保存传递。认真填写好病料送检单。送检单上应详细记录痌料的来源、时间、地点、畜主、送检单位、发病动物的流行病学、症状、病理变化等情况。在解剖采样过程中必须穿戴工作服和手套,注意个人卫生防护。病料采集后要及时对尸体进行无害化处理,被污染的场地要进行彻底消毒。运输病料时,外包装应印上生物危险标示,样品运送需要专人护送。
1、样品的采集
(1)血样的采集
A、根据动物种类确定采血部位。选用真空管、无菌注射器、无菌采血瓶、毛细管等采血,采血量须满足试验需要。
B、若需抗凝血,则视实验要求选择抗凝剂。如需血清,则待血凝固后无菌分离血清并分装于灭菌瓶(管)中。
(2)粪样的采集
将消毒拭子插入动物肛门或泄殖腔中,采取直肠粘液或粪便,放入装有缓冲液的试管或瓶中,尽快送到实验室;若检查消化系统寄生虫,则需采取5-19g新鲜粪便。
(3)子宫阴道内分泌物或外生殖器包皮内分泌物的采集
将消毒好的特制吸管插入子宫颈口或阴道内,向内注射少量营养液或生理盐水,多次揉搓,使液体充分冲洗包皮内壁,收集冲洗液注入无菌容器内。
⑷实质脏器的采集
无菌采集脏器组织块,放入无菌容器内。每块组织应单独放在无均容器内,注明日期、组织和动物名称。注意防止组织间相互污染。供组织病理学检查的组织块的厚度不能超过0.5cm,切成1-2cm的方块,置于至少10倍于组织样品体积的中性缓冲10%福尔马林溶液中。作组织学检查的样品不能冷冻。
⑸皮肤样品的采集
产生水疱或皮肤病变的疾病,应直接从病变部位采样。病变皮肤的碎屑以及未破裂水泡液也可作为样品。
⑹奶样的采集
清洗乳头后采样。弃去头把奶液后采集奶液装满无菌试管。
⑺胚胎的采样
选取完整、无腐蚀的胚胎置于冰桶中尽快送抵实验室。如果在24小时内不能将样品送达实验室,只能冷冻运输送。
2.样品的处理
⑴用于病毒学检验的样品的处理
A、实质器官组织样品的处理
无菌采取一组织块,用无菌剪刀剪碎后,加5-10倍的批pH7.2-7.4含抗生素的营养液,研磨制成组织悬液冻融2-3次或超声波裂解,离心后取上清液做接种培养。
B、胚胎样品的处理同上。
C、分泌物和渗出物的处理
将所采样品用pH 7.3-7.4含抗生素的稀释液作3-5倍稀释,室温感作60分钟后离心取上清液。
D、各种拭子的处理
将所采的拭子立即放入2-5ml pH7.2-7.4含抗生素 营养液中,充分刷洗拭子后,置于灭菌的离心管中室温感作30-60分钟,离心后取上清液。
⑵用于细菌学检验的样品的处理
A、无菌采集的组织病料,接种前无须做特别处理;如果分离的病原菌在组织细胞内,则需在无菌状态下将组织剪碎、研磨,加入5-10倍的缓冲液制成悬液,或加入适量的酶、酸或碱,使组织消化,细菌释出,离心取沉淀接种。
B、有杂菌污染的样品,可选用接种选择性培养基的方法来抑制杂菌的生长。
C、用加热法杀死非芽孢杂菌以分离芽孢菌。
D、奶、尿等样品含量少,要用离心法或过滤法作集菌处理。
⑶血清样品的处理
血清样品通常用于血清学诊断,不需作特殊处理。
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