荧光分光光度法在中药学的应用.docVIP

荧光分光光度法在中药学方面的应用 　　荧光分析法在药物分析中主要用于微量或痕量物质的定性和定量测定,尤其是中药有效成分的检测,在这个领域上的探讨也越来越多,近几年也有报道用于测定脂质体的包封率。但是荧光分析的干扰因素较多,测定时对环境因素敏感,对实验条件要求严格,因此荧光分析法在药物分析中的应用不够广泛,远少于紫外-可见分光光度法。但荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、试样量少和方法简便等优点,故荧光分光光度法在中医药上的应用越来越多[1]。 因为中药的化学成分复杂,有效成分难以确定,仅单方制剂亦为一多种成分的混合物,因此要求更严格和更先进的分离、分析手段进行鉴别和含量测定。近年来,随着科学技术的发展及各种先进仪器的引进和应用,现代仪器分析技术在中药研究中大量应用,其中荧光分光光度法便是中药研究中最为广泛应用的一项技术。 1 荧光分光光度法分析方法分类 1.1直接荧光分析法　 本身能发荧光的物质,可用荧光分光光度法直接测定。鲍霞[2] 认为可用荧光分光光度法直接测定氧氟沙星胶囊的含量。取氧氟沙星胶囊药粉用醋酸-醋酸钠缓冲溶液配溶液,2h 后,室温,用试剂作空白,在RF-5301 型荧光分光光度(日本岛津) 上,以427nm 为激发波长,500nm 为发射波长测定荧光强度,计算其标示量的百分含量。本法操作简单,快捷,灵敏度高,结果满意。 1.2间接荧光分析法　 本身荧光很弱的物质,常采用氧化还原反应、配位反应等化学反应将其变为能发荧光的物质,用荧光分光光度法间接测定。 1.3氧化还原反应　 叶酸本身荧光很弱, 用KMnO4 氧化叶酸,其氧化产物喋呤-6-羧酸能发荧光。刘欣[3] 等人认为通过测定叶酸氧化产物喋呤-6-羧酸的荧光强度,可间接测定叶酸的含量。测定时,在日立850 型荧光分光光度计上,以289nm 为激发波长,440nm 为发射波长,测定叶酸氧化产物喋呤-6-羧酸的荧光强度,同时做空白实验,间接测定叶酸的含量。本法较直接荧光分析法测定叶酸的灵敏度提高12.5倍。 1.4配位反应 铋(Tb) 作为荧光探针,能与喹诺酮核形成m3→m 发光配合物。王磊[4] 等人用荧光分析法测定诺氟沙星胶囊的含量,加入1. 6 ×10- 4mol/L Tb3 + 溶液和pH6.0HOAc/NH4OAc 缓冲溶液,在日立850 型荧光分光光度计上,λex 330nm ,λem 545nm处测定其相对荧光强度。本法具有线性范围宽,灵敏度高,简便,快速等特点。 2应用 2.1在中药药代动力学研究中的应用 　以荧光检测器代替紫外/ 可见分光光度法检测,大大提高了分析的灵敏度,使分光光度法得到更广泛的应用。赵维中等[5]对芸香甙的药代动力学进行了研究,利用荧光分光光度法测定其不同时间的血药浓度,应用3P87药代动力学软件程序对数据进行处理,符合三室模型。胶囊荧光法利用胶囊溶液对荧光物质的溶解、增敏作用而成为测定微量、痕量荧光物质的一种廉价、快速分析方法。庞志功等[6] 研究兔血浆中延胡索乙素的药代动力学,血液中存在的延胡索乙素为痕量物质,直接荧光法难以测出,而使用胶囊荧光法则使最低检测限达2.5×10 - 11 g/ mL 。汪宝琪等[7] 利用胶囊荧光法,在适当条件下对血浆中秦皮甲素、乙素进行定时监测,并使用β2环状糊精单分子胶囊荧光技术对甘肃道地药材秦艽中龙胆苦甙在兔血中吸收代谢进行24 h 监测,绘制用药时曲线,效果良好。 2.2　在中药质量控制研究中的应用 　荧光分光光度法具有灵敏度高、选择性好、方法快捷、试样量少等特点,广泛应用于中药及其制剂中胺类、甾体类、维生素、蛋白质、氨基酸和酶等的分析。对于中药及其制剂中微量、痕量物质的分析也常采用荧光分光光度法,该法尤其适用于生物体液中药物及其代谢产物的分析。 3结语 荧光分析法,与其他方法测定同一样品,结果基本一致,而荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、试样量少和方法简便等优点,特别适用于微量或痕量物质的定性和定量测定,尤其是对中成药有效成分的定量测定具有较重要的意义。荧光分析法在医药上应用的研究,近几年已取得一定的成效和经验,但还有待我们进一步深入研究,提高药品的检测水平,以适应我国加入WTO 后对药品质量的要求。 参考文献 [1]荧光分光光度法在医药上的应用.陈艳，陈庆强.广东药学,2002,12(4):63-65 [2]鲍霞.荧光光度法直接测定氧氟沙星的含量.光谱实验室,2001 ,18 (2) :265～267 [3]刘欣,黄汉国.高锰酸钾氧化-荧光分光光度法测定片剂中叶酸的含量[J].分析化学,2000 ,28 (11) :1406～1409 [4]王磊,韩本政,桑立红,等.诺氟沙星-铽荧光体系的研究及分析应用[J].中国医药工业杂志.2000 ,31 (11) :508～509 ,517