蔬菜中残留农药的提取方法.docVIP

《农产品质量检测》作业 2009年 7月 1号 蔬菜中残留农药的测定方法 蔬菜中的残留农药一般有四大类，即有机磷农药、有机氯农药、拟除虫菊酯类农药和氨基甲酸酯类农药。 一、常规仪器测定法 1. 蔬菜中有机磷农药的多残留测定 ⑴ 原理：含有机磷的试样在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式，放射出波长526nm的特征光；这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。 ⑵ 试剂：丙酮、二氯甲烷、氯化钠、无水硫酸钠、助滤剂硅藻土545农药标准溶液的配制：分别准确称取各标准品，用二氯甲烷为溶剂，分别配制成1.0mg/ml的标准储备液，储存于4℃冰箱中，使用时根据各农药品种的仪器响应情况，吸取不同量的标准储备液，用二氯甲烷稀释成混合标准使用液。 ⑶ 仪器：组织捣碎机、粉碎机、旋转蒸发仪、气相色谱仪（附有火焰光度检测器） ⑷ 分析步骤：a 提取：称取500g试样，置于300ml烧杯中，加入50ml水和100ml丙酮，用组织捣碎机匀浆1-2min。匀浆液经铺有两层滤纸和约10g硅藻土545的布氏漏斗减压过滤。取滤液100ml移至500ml分液漏斗中。 b 净化：向滤液中加入10-15gNaCl使溶液处于饱和状态。猛烈振摇2-3min，静置10min，使丙酮与水相分层，分离出水相后，水相用50ml二氯甲烷振摇2min，再静置分层。将丙酮与二氯甲烷提取液合并经装有20-30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水滤入25ml圆底烧瓶中，再以约40ml二氯甲烷分次洗涤容器和装有无水硫酸钠的漏斗。洗涤液也并入烧瓶中，用旋转蒸发仪浓缩至约2ml，浓缩液转移至5-25ml容量瓶中，用二氯甲烷定容至刻度。 c 气相色谱测定：气体速度：氮气50ml/min、氢气100 ml/min、空气50 ml/min 温度：柱箱240℃、气化室260℃、检测器270℃ 测定：吸取2-5uL混合标准液及试样净化液注入色谱仪内，以保留时间定性，以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。 2. 蔬菜中有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留的测定 ⑴ 原理：试样中有机氯和拟除虫菊酯类农药用有机溶剂提取，经液-液分配和层析净化出去干扰物质，用电子捕获检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。 ⑵ 试剂：a 石油醚、苯、丙酮、乙酸乙酯、无水硫酸钠； b 弗罗里硅土：层析用，用620℃灼烧4h后备用，用前140℃烘2h，趁热用弗罗里硅土总质量5%的水灭活。 标准溶液的配制：分别准确称取标准品，用苯溶解并配成1mg/ml的储备液，使用时用石油醚稀释配成单品种的标准使用液。再根据各种农药品种在仪器上的响应情况，吸收不同量的标准储备液，用石油醚稀释成混合标准使用液。 ⑶ 仪器：气相色谱仪（附电子捕获检测器）、电动振荡器、组织捣碎机、旋转蒸发仪、层析柱 ⑷ 分析步骤：a 提取：称取20g蔬菜试样，置于组织捣碎机中，加入30ml石油醚，于捣碎机上捣碎2min，捣碎液经抽滤，滤液移入250ml分液漏斗中加入100ml20g/L硫酸钠水溶液，充分摇匀，静置分层 ，将下层溶液转移到另一250mL分液漏斗中，分别用20ml石油醚萃取，合并三次萃取是石油醚层，过无水硫酸钠层，滤液于旋转蒸发仪上于40℃水浴浓缩至10ml，待测。 b 净化与浓缩：准确吸取试样提取液2ml,加入已淋洗过的净化柱中，用100ml石油醚-乙酸乙酯洗脱，手机洗脱液于蒸馏瓶中，于旋转蒸发仪上40℃水浴浓缩近干，用少量石油醚少量多次溶解残渣于刻度离心管中，最终定容至1.0ml，供气相色谱分析。 c 测定 色谱柱：石英弹性毛细管柱，0.25mm×15m，内凃有OV-101固定液气体充速：氮气40ml/min，尾吹气60ml/min，分流比1：50 温度：柱温自180℃升至230℃，保持30min；检测器、进样口温度250℃ d 色谱分析：吸收1uL试样液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰高。再吸取1uL混合标准液进样，记录色谱峰的保留时间和峰高。根据组分在色谱上的出峰时间与标准组分比较定性，用外标记法与标准组分比较定量。 3. 蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留量的测定 ⑴ 原理：含氮有机物被色谱柱分离后在加热的碱金属片的表面产生热分解，形成氰自由基，并且从被加热的碱金属表面放出的原子态的碱金属接受电子变成CN-，再与氢原子结合。放出电子的碱金属变成正离子，由收集极收集，并作为信号电流被测定。信号电流的大小和含氮化合物的含量成正比。以峰面积或峰高比较定量。 ⑵